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网友[txh]求助：
本人目前在做大鼠及成人的胰岛分离，已做过7、8次，对实验条件也作了摸索（包括不同的胶原酶、消化时间、理化条件等），能看到很多胰岛，但始终解决不了消化分离过程中出现的胶冻样物质的问题，而一旦出现这种东西，胰岛就很难纯化（都被胶冻样物质给粘住了）。目前毫无办法，希望在这方面有经验的战友提点建议，也希望大家来讨论。

网友[zhilele]认为：
本人做过大鼠的胰岛细胞分离，我觉得还是跟胶原酶的浓度、消化时间、温度有很大关系。我一般用的是0.5mg/ml的胶原酶（浓度过大就会产生胶状物质），分次消化，每次时间不超过10分钟，37度振摇，并同时在镜下观察，第一次消化胶原酶的体积可以稍多一点，后面几次就尽量减少胶原酶的用量，最后可以用机械法分离（吹打）。

网友[dongwp]认为：
zhilele的见解不正确，并且用的消化方法也不好。成年动物的胰腺外分泌很丰富，剪碎胰腺会有大量的消化酶释放出来，这些消化酶不同于胶原酶（特异性作用于相应的胶原组织），对细胞有很大的影响，所以成年动物的消化多采用原位灌注。让胶原酶作用于胰岛外的纤维膜而使胰岛脱落下来，一般消化8-10分钟，并不需要10分钟一次分次消化。

其实胶状物质的产生并不是胶原酶浓度过大，因为胶状物质是不完全消化的产物（如果是胶原酶消化产生的，应该是胶原酶浓度太低才对）。一般认为是消化液与组织的比例不够（应＞10：1），其根本原因还是外分泌腺，足够的比例是为了稀释外分泌腺释放的消化酶，另外，胚胎或新生动物的胰腺消化就不太出现胶状物质。

图是相差的照片：

网友[zouchunlin]认为：
胶冻样的东西是死细胞释放的DNA，在消化液中加DNAase即可。


编辑：bluelove