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超声波与微泡声学造影剂

增强体外培养肿瘤细胞基因转染实验研究

重庆医科大学附属第二医院超声科 重庆医科大学超声影像学研究所（400010）

重庆医科大学病毒性肝炎研究所 *

冉海涛   任  红*   王志刚   郑元义   张群霞   许川山

目的：观察超声波与微泡声学造影剂能否增强体外培养肿瘤细胞基因转染及其转染效率，初步摸索适宜的超声辐照条件。

方法：将培养HepG2细胞分为3组，第1组为单纯造影剂转染组：加入5µg绿色荧光蛋白质粒（P^EGFP-C1）与微泡声学造影剂混合液进行转染；第2组为脂质体转染组：用相同浓度P^EGFP-C1质粒进行常规脂质体转染；第3组为造影剂加超声辐照转染组：加入5µgP^EGFP-C1质粒与微泡声学造影剂混合液，然后分别用0.25W/cm²、0.5W/cm²、1.0W/cm²超声波经培养板底部辐照10s，24小时后用荧光显微镜观察各转染组细胞荧光蛋白表达情况，计录每高倍视野（400×）荧光蛋白表达阳性细胞数。

结果：纯造影剂转染组未见荧光蛋白表达阳性细胞，造影剂加超声辐照转染组可见不同程度荧光蛋白表达，其中以0.5W/cm²超声辐照组表达最强，每高倍视野绿色荧光蛋白表达阳性细胞数为20.7±3.2个/HP，高于0.25W/cm²与1.0W/cm²超声辐照组（分别为4.8±1.9个/HP；9.9±2.3个/HP），与脂质体转染组（22.1±3.5个/HP）比较无显著差异（P>0.05）。

结论：微泡声学造影剂加一定强度的超声辐照能显著增强体外培养肿瘤细胞的基因转染与表达，超声辐照条件是影响转染率的重要因素，适宜条件时其转染效率与常规脂质体转染方法无显著差异。