发布日期: 2012-07-08 12:06 | 文章来源: 丁香园 |
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1.最佳量程的选择和设定量程
(1)移液范围选择在满量程的35%到100%时,可以保证最佳的准确性和重复性。选择合适的量程可以提高1%移液精度!
(2)移液器量程设定原则:由大到小。当由小量程调节到大量程时,旋转调节旋钮到达超过所需量程1/3 圈处,然后回调到所需量程准确位置。此操作有助于提高0.2%移液精度。
2.吸头浸没的深度和角度
各种型号规格的移液器推荐的吸头浸入深度如下所示:
规格 | 浸入深度 |
2~10μL | |
20~100μL | |
200~1000μL | |
5000~10mL |
吸头浸入深度非常关键。如果不适当,实际移液容积可能就不准确。
使用时,吸头浸入角度同样重要,应保持移液器垂直或倾角20 度以内。
吸液时,注意使吸头在样品中保持1 秒(对移取大容量或高粘度样品适当延长时间),而后平缓抽出吸头。
3.移液器的使用指南和注意事项
(1)在移液过程中各操作步骤是否保持一致将对重复性产生很大影响。
应保持吸液和排液节奏的一致性。
按压或释放按钮的速度平稳一致。
到达第一停止点的用力应保持一致。
吸头的浸入深度保持一致。
移液器保持垂直线或20 度以内倾角。
(2)针对高粘度样品可采用反向模式移液,即同常规移液模式相反的流程(第二停止点吸液,第一停止点排液)
4.通过采取以下几项措施,可以防止液体进入套柄内:
(1)利用RAININ 公司带滤芯的吸头,它有个内部疏水过滤器,避免气雾和液体进入套柄;
(2)当吸头中有液体时,不要颠倒或平放移液器;
(3)缓慢吸液,握住移液器保持垂直或20 度以内倾角;
(4)量程在5ml 和5ml 以上的移液器,配合使用厂家提供的专用安全过滤器。
5.预先润洗吸头
有些溶剂,比如浆液,含蛋白溶液,有机溶剂等,都有可能会残留液体薄膜在吸头内壁上,这样所得的错误值远大于规定的允许值。而使用该吸头继续进行移液时,薄膜会保持相当的恒定。因此要获得很好的移液精度,可以在安装新吸头后,用相同样品对吸头进行润洗。这样也有助于提高移液操作的准确性和重复性。
6.温度因素考虑
即使是移取热或冷的液体,只要保持前后操作一致,也能够得到很好的移液精度,有利于减少在移液过程中由于热胀冷缩而引起的误差效应。另外,缩短在吸液和排液过程中时间上的延迟,也有利于减少误差。为达到最好的精度和准确度,在移取那些自身温度和环境温度有较大差别的液体时,每次最好都使用一个新的吸头,同时注意不要预先润洗吸头。在操作之前,要先保持移液器和周围环境温度的一致。
7.高温消毒
对于RAININ 移液器,可经高温消毒的部分是套柄、套柄耦合器和吸头推出器:121 摄氏度,1 个大气压,15-20 分钟。
注意:不要把整支移液器或其他任何部件进行高温灭菌。
8.避免接触酸性和腐蚀性物质
在移取高浓度的酸性或强腐蚀性溶剂后,应拆卸移液器,然后清洗活塞(用蒸馏水或异丙醇)、套柄和密封部件。在完全干燥后,再重新安装好。
过度接触腐蚀性的气雾会腐蚀活塞,这样就会导致密封装置过早损坏甚至需要更换活塞。使用带滤芯的吸头可以有效的减少移液器内部零部件暴露在腐蚀气雾中的可能。
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