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手把手教你作大鼠线栓（MCAO）模型＋灌注取脑＋TTC染色（一）

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发布日期: 2006-11-11 21:53	文章来源: 丁香园
关键词: 大鼠线栓模型 MCAO 灌注取脑 TTC染色	点击次数：

12、成功后结扎中间那根线，可见第一个标记距动脉分叉约2mm。

13、缝合。

14、缝好后用酒精棉球消毒皮肤缝合处。

15、缝好后的效果如图，外面的鱼线最后用记号笔涂黑，便于再灌拔线时观察。

16、将大鼠放回笼内。

17、2小时再灌。

18、醒后看效果，左爪不能伸展（完全醒后可见绕圈或追尾、倾倒），我们的体会，症状2-3分的死亡率高，1-2分的死亡率低，有的大鼠第二天或几天后可无明显症状，但取脑后还是有梗死灶的。

附：一般文献上的MCAO制作方法＋评分标准。

局灶性脑缺血再灌注模型的制备根据longa提出的可逆性大脑中动脉闭塞（MCAO）线栓法并根据大鼠脑解剖结构图加以改进制作。局灶性脑缺血再灌注模型，以10%水合氯醛0.3ml/kg腹腔麻醉，颈正中切口，暴露颈总动脉（CCA）、颈外动脉（ECA）及翼腭动脉，将0.26mm单丝尼龙鱼线头端0.5cm用石蜡包被，并于20mm长处标记。全部大鼠均通过右侧CCA切口处插入，翼腭动脉短暂夹闭以防误插，栓线长度自CCA分叉处约18～20mm。根据动物体重而定，栓塞右侧大脑中动脉，然后缝合皮肤，栓线尾端部分固定于皮肤上。缺血达到2h后小心抽出栓线，即形成再灌注。假手术对照只是不插入尼龙鱼线，其余步骤同手术组。在缺血期间及再灌注后2h保持体温在（37±0.5）℃。模型成功的标志为以大鼠手术麻醉清醒后出现左侧肢体瘫痪，站立不稳，提尾时向一侧转圈为模型成功的判断标准。

神经功能缺失体征评分　参考Longa及Bederson的5分制法在动物麻醉清醒后24h进行评分。0分：无神经损伤症状；1分：不能完全伸展对侧前爪；2分：向对侧转圈；3分：向对侧倾倒；4分：不能自发行走，意识丧失。分值越高，说明动物行为障碍越严重。

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　　　作者: 雨后天晴、皮皮


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