氨基酸的高效液相检测条件以及样品的处理
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网友[刘燕霞lyx]问:
有谁能够告诉我用高效液相检测15种氨基酸的详细条件以及柱前样品的处理?我用岛津公司提供的梯度参数能检出来,但是每种氨基酸峰之间的分离度不是很好,在验证里面没有什么说服力。
网友[savage22go]答:
代价很大的,提醒一下:可以用蒸发光检测器,不用衍生。要衍生的化大概需要两万人民币买衍生试剂和柱子,柱子多备两根。衍生的效果要看各人的操作水平。一般一个复合氨基酸高效液相的方法建立市面上大概售价是25~40万不等 。
网友[晓荷]答:
不要灰心,自己选衍生剂一样可以分离得很好的,氨基酸分析有几个关键点,第一是衍生,一定要确保完全衍生,文献中的几个衍生剂都可以用,第二是流动相的条件,对PH值要求很苛刻,一般要精确到小数点后两位,否则是不行的。第三是检测器,个人认为是用紫外要荧光好一些,尽管大多数的衍生剂都有荧光,耐心操作,还是可以完成的。
网友[ranxiangchun]答:
我今天打电话给我同学了,他的提取方法采用的是江南大学里的提取方法(他老板是江南大学里的博士),游离的氨基酸应该更好做。流动相就是按照安捷伦柱子说明上来的,要改动一下,同学说变动不大,根据图谱就可以调好流动相。荧光和紫外都可以检测,但荧光的灵敏度大约要高10倍左右。我同学就说怎么多,他过几天要面试,不方便打扰他。他的那个说明书现在也找不到了。我也就不给你联系方式了,现在关键是那个柱子的说明书。你试试打电话到安捷伦销售的那里,跟他们要一个,说要买,先看看情况。做实验不要急,慢慢来,做做停下来想想,要不断总结。想方设法找全你要的资料。这是我的经验,勉励你一下,加油!
网友[phoenix1985]答:
我感觉氨基酸柱前衍生的话,关键是氨基酸分析柱,还有衍生的几步操作!你说的脑蛋白提取物注射液的分析,我也做过,我用的是PITC柱前衍生做的,以下是我的色谱图。

(氨基酸的高效液相色谱图,由丁香园网友phoenix1985提供)
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