降解组测序Degradome sequencing
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发布日期: 2010-11-09 22:19 文章来源: 华大基因
关键词: 降解组 测序 华大基因 点击次数:

MicroRNAs(miRNAs)是生物体内源长度约为22个核苷酸的非编码小RNA,通过与靶mRNA的互补配对在转录后水平上对基因的表达进行调控。在植物中主要是通过与靶基因进行完全或近乎完全的配对导致mRNA的降解来进行调控,在动物体内以抑制基因翻译居多,同时也存在部分对靶基因的剪切降解作用[1]

降解组测序(Degradome Sequencing)主要针对miRNA介导的剪切降解片段进行测序,从实验中筛选miRNA作用的靶基因,并结合生物信息学分析优势,确定降解片段与miRNA精确的配对信息。该技术能够对细胞或者组织中由miRNA介导mRNA降解的剪切片段进行深度测序分析,准确高效地筛选出miRNA的靶基因,为研究miRNA以及其对应的靶基因的相互关系提供了有效的手段。

一、技术流程:

 

二、信息分析流程

 

具体的生物信息分析如下:

1. 降解片段在选定的基因组上的分布

2. 鉴定样品中的rRNA、tRNA、snRNA、snoRNA、polyN等非编码RNA

3. 鉴定样品中表达的靶mRNA

4. 统计mRNA的降解位点信息

5. 从miRBase指定范围,寻找与降解的mRNA相关的miRNA,并作出示意图

三、技术优势

♦ 高通量:一次测序得到1000万条以上的序列

♦ 准确性高:从几个到数十万个拷贝的精确计数

♦ 高分辨率:可以检测单碱基差异

♦ 重复性好:深度测序保证了检测随机性,不需要技术重复

♦ 一站式服务:提供从miRNA鉴定、靶基因筛选到基因差异表达研究的完整解决方案

四、应用领域

五、参考文献:

[1] Fedor V. Karginov, Sihem Cheloufi, et al. Diverse Endonucleolytic Cleavage Sites in the Mammalian Transcriptome Depend upon MicroRNAs, Drosha, and Additional Nucleases.Molecular Cell ,2010(38):781-788

[2] German MA, Pillay M, Jeong DH, Hetawal A, et al. Global identification of microRNA-target RNA pairs by parallel analysis of RNA ends. Nat Biotechnol. 2008, 26(8):941-946.

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