dxy

走进地平线 ：#干细胞培养心得#我现在在养人脐带MSC，感觉分离纯化挺关键的，我现在用的是别人分离好的，培养起来还是挺容易的，注意无菌操作非常重要。当然，在诱导分化的过程中，也遇到了很多的问题，希望能向更多的大师学习学习。
 
贺老六 ：#干细胞培养心得#干细胞是方向、是希望，但是现在用于临床尚不成熟。
 
zhangwan8686 ：#干细胞培养心得#干细胞用途颇广，我所在的实验室分离培养多种干细胞用以移植研究。首先，组织来源要新鲜，分离需及时，掌握好消化时间，另外，培养基的选择和配置对细胞生长的影响至关重要。最后，强调整个操作流程注意无菌操作，一旦污染，之前所有的工作全部功亏一篑！
 
ssjspring ：辛苦呀，一开始看到细胞疯长，心里那个高兴呀，后来做了鉴定，不是，阳性率接近0，心里那个郁闷呀！难难难，难于上青天！
 
zx314 ：#干细胞培养心得#养过间充质干细胞，坎坷颇多，一开始不知到它会长得很慢，养了1周不见增长，之间细菌。还以为方法不对。多次尝试骨髓冲洗，后经人介绍才知道有多种取法，打算再尝试重新取材时，发现数目变多，惊喜。
 
zhiyao ：#干细胞培养心得#貌似简单，一目了然的操作流程；其实中间暗藏了很多需要注意的细节，也许就是这么个小细节，它就可以让你提前几天看见你要的希望。
 
wangsandan0503 ：培养脐带间充质干细胞，传代培养，一般3天换液正好，换液太勤，生长因子全部换掉了，反而长的慢。传代的时候一般胰酶消化不应该超过5min，离心1000rpm 5min即可，细胞要及时冷冻，防止老化太快了，后续没有合适的可以用。
 
lancher ：#干细胞培养心得#培养的脂肪来源干细胞，刚开始的时候随便怎么养都长得很好，但是去年7-9月的时候简直没把我整崩溃了，其中辛酸只有经历过的人才知道。个人还是觉得原代的时候细胞密度应该稍微大一点，一般7.5ml接种一个皿，让其迅速长起来，然后传代，还是用P2-P4的细胞好一点。
 
syfcik ：#干细胞培养心得# 1 杜绝污染：干细胞培养一般不加抗生素，所以要进行严格的无菌操作，关键是时刻要有无菌的意识，不能粗心大意。2 如果是原代培养的干细胞，最好取3-5代做实验，尽快完成实验，如果取5代-10代的细胞做实验，很多时候会出现各种难以解释的现象，做不出想要的结果，这个非常重要。
 
太匆匆 ：#干细胞培养心得#觉得应该注意传代时间，传早了细胞没长满，传晚了细胞就老了。细胞纯度也很重要，差速贴壁可以初步纯化一下。无菌操作要有意识，传代时问题不大，原代如果污染的话就很亏了。细胞冻存的时候数量一定要足够，否则复苏出来的细胞很少。
 
03086 ：#干细胞培养心得#开始很担心，去别的实验室看别人怎么养，学习。去丁香园看大家的经验。自己培养每一步都很小心，消毒最关键，没有污染，否则就前功尽弃了。试剂还都不便宜，辛苦压力大。
 
tinybearcga ：#干细胞培养心得#总有买不起的试剂，总有拿不准的配方，总有传不好的细胞，总有看不完的文献，总有hold不住的污染，总有做不出的结果，总有跟不上的进度，总有想不到的惊喜，总有不经意的茫然，总有不期而遇的成功。做细胞水平的实验，是很寂寞的。望共同进步。
 
月夜疏影 ：#干细胞培养心得#我现在养的是精原干细胞（SSC），就是从性腺分离并继续培养的过程很麻烦，很难分离得到SSC，如果想准确得到就是多培养，熟悉掌握SSC的特征，一旦发现再进行分离培养。
 
风中流尘 ：#干细胞培养心得#啥时候细胞养出来顺我意，如我愿，我就真心谢天谢地谢神谢佛啊。。有时候细胞养着很活波可爱，蓦然间翻脸不认人。。真心难伺候啊。。
 
zy20008 ：#干细胞培养心得#我们培养少突胶质前体细胞，采用传统的恒温振荡差速贴壁法获取该细胞，每次付出很多却得率并不高，且每次不是很稳定，不算上污染等人为因素（自认基本可保证没有污染可能），但细胞状态有时很好有时很差，且用病毒转染后细胞移植至动物模型中效果也不稳定，真的还有很长路走。
 
xiaowusheng ：#干细胞培养心得# 干细胞培养的确很不容易，本人养干细胞5年，虽然现在什么干细胞到了我手上都能养好。但是这很大程度取决于实验室条件，污染是养干细胞最大的问题。
 
patrickgown ：#干细胞培养心得#我们养人的间充质干细胞，细胞培养的过程是蛮困难的，刚开始培养的时候连传代都传不匀还蛮不好养的，用的是10%的CS培养液并且诱导分化，感觉成熟的细胞出现的时候真还挺兴奋，干细胞的潜能蛮多的。引用一句我们学校院士的话：干细胞的诱导分化是需要想象力的，要敢想才敢做。
 
北冥有庾 ：我是培养兔骨髓间充质干细胞BMSCs，细胞培养过程中的酸甜苦辣都尝了一遍。查阅资料请教老师的苦累，大年初一不能回家团聚的辛酸，细胞长势喜人的甜蜜以及发表核心和SCI的兴奋。等等这些只有经历过的人才能真正体会。
 
wshuangc ：#干细胞培养心得#以前养过ips，那是一个娇弱啊~现在开始养msc。养细胞可真是一个精细活儿，让我这种毛手毛脚的人几乎望而却步了~
 
newjonah ：我 是从胶质瘤细胞系中培养干细胞，用的是无血清培养基添加因子是bFGF EGF B27，每天半量换液，大概7天后能够成球，但是这个球到底是不是干细胞，自己是存很大的疑问，本来什么细胞养上7天都能成球，用某些人的话说：你说是就 是你说不是吧它就不是，最好的方法还是做流式分选这样才比较有说服力。
 
麦兜的癞皮狗 ：我 们实验室养神经干细胞也有些时间了，起初是胎鼠两个大脑半球的细胞都收集，基本是都可以养成神经球，没有什么杂细胞；现在是只收集海马组织的细胞，但是细 胞量就少了很多，可以边培养边提纯，但细胞量保证不了；尤其是加了神经元特异性的培养基，还不知道效果怎样，希望以后能建个细胞系吧！
 
鱼小 ：#干细胞培养心得# 哎，干细胞培养。别提了，曾经养了半年的枯草芽孢杆菌！
 
aoc_chen ：#干细胞培养心得#下面是第一代和第二代的成球图片！

aoc_chen ：我是从乳腺癌细胞系中培养肿瘤干细胞，感觉不难，但是需要摸索，尤其是生长因子的添加种类，采用的方法是无血清的DMEM培养基加EGF、b-FGF、B27、insulin，最后的结果是B27很重要，有了它很容易成球，传代时间一般10-14天，但是中途每隔两天必须添加生长因子（半量换液），传代2-3次后，成球更容易！
 
dengmao2002 ：#干细胞培养心得#暂 时还没有心得，接下去的实验要涉及到间充质干细胞的分离培养，看到各位站友的留言，似乎不是那么容易的事情，有些忐忑啊，但查找了一下相关的文献，国内做 这方面培养的人还是挺多的，似乎也形成了一定的培养方法，不知道届时自己养会不会一帆风顺，但愿吧，那些细胞要拿来很大用处啊
 
ninaniu ：#干细胞培养心得# 我用山羊的bMSCs做实验，通常只用P2，P3两代，感觉接种的时候就要考虑密度，让细胞不同时间达到100%融合，融合了就用掉，没有及时用，它就会 开始老化，时间久些就会自发分化，形态上也会发生明显改变。细胞实验时间久，千万要注意每一次实验的细节，避免功亏一篑，实验过程注意记录
 
leng307111731 ：#干细胞培养心得# 最近看了很多关于肿瘤干细胞的文献，本想从这方面研究，没想到刚有那么点苗头，就被老板给枪毙掉了。不过以后还是想从这方面去做，希望能在这学到更多的知识。谢谢大家。
 
zifuli2010 ：每次从兔子骨髓提取内皮祖细胞然后移植，总是一项非常繁重的工作。第一首先要无菌操作，污染了以后每个环节都要进行寻找原因，会花大量的时间和精力；2.病毒转染更有效，3.研究不容易出结果。
 
liyucong ：我培养的是骨髓间充质干细胞，总体感觉兔子要比大鼠的好养，大鼠非常容易老化~传代时间要把握，有时急着传代，怕密度抑制，结果分瓶后细胞密度太稀了，长得很宽大，最后长满后也没有之前几代那么漂亮的梭状，全骨髓培养方法简便容易掌握力~~养细胞不难但是也够纠结的~
 
taoist_zc ：#干细胞培养心得#一丝不苟得态度，呵护备至的操作。。。养干细胞确实需要心细如发。。。
 
swd930077 ：#干细胞培养心得#一个很深奥的课题，希望可以用来对临床有所帮助。目前，临床的人注重的还是实效。干细胞是实验室的课题。一般临床医生还没有达到此种水平。但可以是梦想。
 
奋斗中的lucas ：#干细胞培养心得#大学毕业论文的课题是乳鼠心肌细胞的一个实验，那真的是细致活。每天定时定量的更换培养液，检查温度，湿度，观察每个培养皿细胞的存活情况。记得有一次，就是给培养液抽滤用的超滤膜多浸泡了一个晚上，导致后面的所有的细胞被污染，直接损失了差不多2k和三个星期的时间。细节才是王道
 
nuanfenglover ：# 干细胞培养心得 二氧化碳培养箱及操作间一定要护理好，以免长菌，注意操作规范，严格掌握灭菌技术，我们用的是昆明小鼠（出生三天内），断头取海马组织培养，过程就不说 了，主要因子B27、bFGF 、EGF都是小鼠源的，也用过大鼠源的，都不理想，大家给点宝贵建议吧！
 
wendywan ：据 外媒爆料说，美国科学家马利欧·卡佩奇在获得2007年诺贝尔奖之前痴迷于干细胞研究，有时候着迷地厉害，会临时中午去机场，随便赶上哪班就搭上哪班机， 比如飞到伦敦，独自蹲在广场上喂一下午鸽子，。。。 这段话梁朝伟也好像说过，说他的经历，呵呵，看来原创是马利欧·卡佩奇。呵呵！
 
lisha301 ：#干细胞培养心得#我先看着师兄师姐们做，后来就开始自己做，但是每次都是因为一些小的细节而导致实验失败，可能是我比较笨吧，呵呵，两个月才差不多摸清细胞的性质，才能注意所有的小问题，真是不容易啊。
 
陌上花已开 ：#干细胞培养心得#从上研究生我就跟着师兄培养骨髓间充质干细胞，第一次成功从SD大鼠中取出，并且长得相当好。这学期单独培养，还要培养血管平滑肌细胞，认为前期准备工作相当重要。希望我的细胞和后续试验能够顺利进行！
 
下个礼拜一星期几 ：#干细胞培养心得#最近操作神经干细胞（SD大鼠胎鼠脑组织分离得到）的培养的失败次数比之前多了很多，一直在对比找寻原因。目前自己总结有大致以下几点：1、培养基放置时间过久2、大鼠的怀孕时间不够3、分离时间太长，分离时尽量在冰块上操作。欢迎大家提供建议讨论。
 
cheff0412 ：#干细胞培养心得#刚培养干细胞时，由于当时实验室培养体系已经很成熟，而且有前辈们的细心指导，所以还算顺利。但培养的次数多了，时间长了，越来越觉得干细胞培养称得上是一件工程，一项建筑。把干细胞养起来不算太难，但想养的形态完美、活性十足，那就需要你对整个工程了如指掌，尽善尽美。
 
枫叶飘飘2011 ：#干细胞培养心得#原 代培养长得特别慢。我当时养的是大鼠的骨髓间充质干细胞，在这之前还养过小鼠的MSC，不过小鼠的骨髓腔的MSC含量太少了，没养成功。后来养的大鼠的MSC还算顺利，不过要注意的是全骨髓培养时要及时换培养基，因为骨髓里含有很多其他的细胞比如血细胞，这些红细胞死亡后对MSC有毒害作用
 
demeter ：#干细胞培养心得#正在养兔MSC，一开始确实觉得很困难，在园子里得到了好多帮助，现在细胞疯长呢！确实从抽骨髓到养细胞一步步都要注意无菌操作，了解了细胞的脾气，它就会好好长滴！大家共同努力！
 
z8160720 ：#干细胞培养心得#当年养兔的骨髓间充质干细胞的时候，怎么样都养不出来，请教了很多人，也在丁香园上***过，不是污染就是空白。后来，重新梳理了培养步骤，注意了培养时的小细节，那些个干细胞就疯长了，那个高兴呀......嗯，万事开头难，希望各位坚持再坚持，一定会成功的。
 
克林斯曼 ：#干细胞培养心得#当年做神经干细胞培养的时候，需要取16-18天的大鼠胚胎，体积小，骨骼少，还要从里面剥离出大脑组织。这个步骤非常需要技巧和解剖知识，需要尽可能剥离干净血管和脑膜，分离出最好的取材部分。有一步没搞定就前功尽弃，很不容易。