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原理：

RNAi (RNA interference) 即RNA干涉，是由双链RNA（dsRNA）介导的、由特定酶参与的特异性基因沉默现象,它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因的表达。在RNAi研究中，我们可以人工合成特定的dsRNA，对目的基因进行干涉。但设计的dsRNA不同，实际干涉效果差异很大。所以有时候就需要筛选dsRNA片断。

PsiCHECK载体将RNAi与荧光素酶发光相偶联：当RNAi有效时，转录的荧光素酶RNA将被降解，无发光反应；当RNAi无效时，转录的荧光素酶RNA将翻译为荧光素酶，并参与发光反应。通过检测发光即可反应RNAi的效果。

以PsiCHECK-2载体为例：将RNAi的靶片段插入到hRlu片段下游的多克隆位点中，然后将构建好的载体与特定的dsRNA片段或能转录dsRNA的载体共转染进细胞；转然后，细胞培养一定时间，裂解细胞使用ModulusTM多功能检测仪（http://www.yph-bio.com/equip/modulus/modulus.asp）检测荧光素酶的表达情况。

反应：

RNAi反应示意图之一

RNAi反应示意图之二