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实验原理：

经过多年研发，Cisbio合成了能与TK类激酶反应的单磷酸化位点底物，其另一端则接上了biotin。在biotin端，biotin能与streptavidin- XL665（acceptor）相连，完成标记。而在经过磷酸化之后，该底物便能与抗磷酸化位点的抗体（已标有Donor）结合，从而产品FRET信号。

实验准备：
 
      1. HTRF KinEASE TK检测试剂盒
      该系列试剂盒含有（以HTRF KinEASE TK产品为例）：

      1) TK Substrate -biotin
      2) Streptavidin-XL665
      3) TK Antibody-Cryptate
      4) Supplement Enzymatic buffer (SEB reagent)
      5) HTRF Detection buffer
      6) 5x Enzymatic buffer

      2. 实验所需的激酶

      3. ATP

      4. 其他所需试剂（如MgCl2，CaCl2等）
 

一般试验流程（384孔低容量板实验法）：

      Enzymatic Step
      1. 按试剂盒说明，调制部分HTRF试剂
      2. 添加激酶、ATP、化合物及HTRF试剂（Substrate-biotin）
      3. 室温孵化（Incubation）

       Detection Step
      1. 添加HTRF试剂（Cryptate conjugates in lysis buffer）
      2. 添加金属离子(EDTA等)及HTRF试剂（TK antibody-EU in EDTA）
      3. 室温孵化（Incubation）约1小时
      4. 送入读板仪读板（read）

 具体实验背景、实验描述及注意事项，点此下载 protocol进一步阅读。