细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法,实验成本低,可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。
一、实验材料
1. 细胞样品
2. 试剂、试剂盒:无血清培养基
3. 仪器、耗材:6 孔板; marker 笔;直尺;枪头
二、实验步骤
一、准备:
所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和 marker 笔在操作前紫外照射 30 min(超净台内)
二、流程:
先用 marker 笔在 6 孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔 0.5~1 cm 一道,横穿过孔。每孔至少穿过 5 条线。
2. 在空中加入约 5X105 个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
3. 第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。
4. 用 PBS 洗细胞 3 次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。
5. 放入 37 度 5% CO2 培养箱,培养。按 0,6,12,24 小时取样,拍照。
下面是照片,细胞 NIH3T3
0 h
6 h
12 h
24 h