古人云:工欲善其事,必先利其器。没有趁手工具,如何迅速高效完成实验。移液器是实验室最基础的工具之一,没有一套精准好用的移液器怎么轻松完成重复繁重实验操作。
手动移液器由来已久,绝大部分用户已经比较了解其用法。电动移液器在我国的普及程度远远不及手动移液器,致使许多用户对电动移液器认识不深。
移液枪自动化时代的来临,你怎能不知道电动移液枪的使用技巧呢?
移液方式的发展
移液器知识
选择移液器,首先需要针对实验所需,现在市场上移液器的材质普遍能满足一般的移液样品。若移液样品多为强酸强碱,则需要考虑耐化学性,如匹配PVDF外壳、陶瓷活塞。选材优质的移液器能使其性能充分发挥。
以下为常用的移液器材质,以供参考:
材质 |
特性 |
不足 |
|
外壳 |
PVDF |
韧性强,耐腐蚀性强,耐老化性强,耐候性强,导热性较低 |
|
ASA |
耐候性强,耐高温性较好,防静电,表面灰尘少 |
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PEI |
耐高温,抗冲击性强,阻燃性强 |
||
活塞 |
不锈钢 |
机械加工性能好,光滑度较高,强度高,寿命长,耐化学性较好 |
对硝酸的兼容性较低 |
陶瓷 |
耐化学性强,光滑度极高,密封性极佳,强度较高 |
寿命较短 |
|
塑料 |
加工性能好,耐化学性较好 |
容易变形,寿命较短,磨损较快 |
|
马达 |
步进马达 |
精确度高,寿命较长 |
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直流马达 |
速度均匀 |
定位精确度较低,故障率较高,寿命较短 |
移液器校准前准备
操作环境:
温度应控制在15-30℃,恒定在±0.5℃,相对湿度50%-80%,要保持较高的空气湿度以减少水分蒸发对结果造成的影响。建议使用防蒸发装置。测试应在独立无通风的房间内进行,并配备温度和湿度显示。
所需设备:
1、纯水、三蒸水或去离子水,需达到ISO 3696三级水的标准。
2、独立工作间,配备防震、防尘、远离热源、无阳光直射的操作台。
3、温度计、湿度计。
4、分析天平一台。确保室内空气流动平缓,应避免天平正对空调出风口。
根据所测试的移液器的容量来选择适合的天平:
移液器容量范围 |
天平可读性 |
天平的重复性和线性 |
测量不准确度 |
1μl~10μl |
0.001mg |
0.002mg |
≤0.002mg |
10~100μl |
0.01mg |
0.02mg |
≤0.02mg |
>100μl |
0.1mg |
0.2mg |
≤0.2mg |
移液器校准操作
校准操作:
为确保校准的准确性,采用三点移液十次,具体步骤如下:
1、 同温处理,将移液器、吸头、天平、测试用水、操作台等校准用具放置在同一工作间内,至少四小时。
2、 在正式操作前,先预洗吸头,吸排测试用水5次。
3、 用最大体积、50%最大体积和最小体积(或10%最大体积),各移液10次,记录每次移液的质量。
4、 计算每组数据的平均值,代入计算公式,计算出不准确度与不精确度。
5、 对比可允许的最大误差限度,根据实际需要确定进行调整。
附:相关计算公式
质量体积转换
公式1:V=(w+e)×Z
式中: V=体积(μl)
w=质量(mg)
e=蒸发损失(mg)
Z转换因子
以上公式参考ISO 8655标准。
蒸发损失对测量小体积液体影响较大,因此应将蒸发损失计算在内。
方法:在称过重的容器中注入定量清水,按下秒表观察30秒,读出损失量,然后算出每秒的损失量。(若30s内质量损失3mg,则损失量为3mg÷30s=0.1mg/s)。
记录移液时间,将移液时间乘以每秒损失量,算出实际蒸发损失量,代入上述公式计算实际体积。若使用防蒸发装置,通常可以忽略蒸发损失量。不同温度、压力下水的质量和体积不同,具体转换因子Z值请查看附录1。
公式2:V20=m×K(t)
式中: V20=标准温度20℃下实际体积(μl)
m=质量(mg)
K(t)值
以上公式参考JJG 646-2006移液器检定规程。
根据天平测试蒸馏水的质量,以及检测时温度所对应的K(t)值,即可计算出标准温度下蒸馏水的实际体积。具体K(t)值请查看附表2。
计算式时,请根据实际需要,选择公式进行计算。
不准确度(系统误差)
不准确度是指实际移取体积和显示体积的差异。
A= - V0
式中: A=不准确度
=平均值
V0 =标称容量
A%=100%×A/V0
不精确度(随机误差)
不精确度指每次实际移取体积与实际体积平均值的差异,其变化是不可预计的测量误差的一部分。它可以表示为标准差S或变异系数CV:
式中:
S =标准偏差 =平均值 n =测量次数 Vi =单次测量数值 |
CV=100%×S/
点击查看:转换因子Z(μl/mg)数值表(无菌水)
移液器的维护保养
1 清洁和消毒
为确保移液器的准确度和精确度,应根据具体使用情况进行定期保养。尤其在移取腐蚀性溶剂后,应该对移液器进行清洁。通过简单的清洁和保养,可适当地延长移液器的使用寿命。
注意:在清洁或消毒前,请务必将电池取出。
① 外部清洗
方法:根据使用情况,可以用沾有70%乙醇或60%异丙醇的湿棉布拭擦移液器表面,去除外部污垢,再用双蒸水拭擦一遍,然后晾干。
每天开始工作前,检查移液器外表是否有灰尘或污垢,尤其是吸头连杆部分。
② 内部清洗
清洁步骤:
1、 按照步骤拆卸需要清洁的部件。
2、 外套柄、吸头连杆用沾有70%乙醇或60%异丙醇的湿棉布拭擦,再用双蒸水淋洗,然后晾干。
3、 一般情况,O型圈、活塞无需清洁。如沾有固体颗状物,请用干净的干棉布轻轻拭去即可。
4、 给O型圈、活塞上润滑脂,只需涂上薄薄一层即可。
5、 按步骤组装好移液器。
③ 消毒
移液器清洁干净后,在121℃,1bar下,消毒20分钟。消毒后在室温下冷却至少2个小时后方可使用。部分手动移液器可整支消毒,电动移液器只可以下端消毒,请根据产品的具体情况进行消毒。
整支在紫外线下进行消毒灭菌,无需拆卸。
2 日常维护:
针对不同性质的液体,有不同的清洗和保养方法,点击查看详情
移液器的储放以及注意事项
1、 储放
日常储放:使用完毕,请将移液器竖直挂在移液枪架上。当移液器吸头内有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞。
当产品长期不使用时,请将电池取出,然后将清洁消毒后的移液器在干燥、洁净、常温下储存。避免放置在温度变化大、湿度高、灰尘量大的环境中。
2、 注意事项
- 在移液器的化学腐蚀力限度以内使用
- 请勿移取高度易燃的液体
- 若移取液体与移液器、吸头温度不一致时,移取结果可能会出现偏差,因此三者应保持温度一致
- 请勿在有爆炸危险的气体范围中使用本产品
- 请勿蛮力使用、拆卸移液器
- 若移液器无法正常运作,应立即停止操作,查阅故障分析章节
- 操作温度应保持在15℃到40℃之间,相对湿度应在80%以下
- 请妥善放置移液器、充电器等物件,避免意外跌落造成损坏
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