茵栀黄地塞米松诱导大鼠肝葡萄糖醛酸转移醇活性的研究

【摘要】 目的：研究茵栀黄，地塞米松对SD大鼠肝UDP-葡萄糖醛酸转移醇(UDPGT)活性的影响。方法：建立蓝桅黄、地塞米松诱导的SD大鼠的动物模型．参照Black氏方法驯定大鼠肝UDPGT活挂。出现最大效应的时间分别是：茵栀黄为诱导第3天，地塞米松为诱导第5天并伴有肝蛋白盾舍崴争肝重增扣。结论：茵扼黄、地塞米松均能诗导大鼠肝UDPGT活性，但两者的诱导机理可能不同。

 

【关健词】 茵栀黄注射液;地塞米松;二磷酸尿葡萄糖醛酸转移醇 体内诱导

 

1 材料与方法

1.1 动物 雄性SD大鼠96只．鼠龄6～8周．体重160~230g，由广西药物研究所实验动物室提供。

1.2 药物 茵栀黄注射液(每支l0ml．含黄芩甙200mg,茵陈提取物60mg．栀子提取物32mg．北京第四制药厂生产)，地塞米松磷酸钠注射液(5mg／ml，江苏天晴制药总厂生产)。

1.3 主要试剂 苯巴比妥，上海化学试剂采购供应站分装厂产品；胆红素、尿嘧啶二磷酸葡萄糖醛酸(UDP-GA)．为美国Sigma产品；洋地黄皂甙，德国麦克公司产品；牛血清白蛋白，卫生部生物制品所产品。

1.4 大鼠肝酶诱导模型 将96只大鼠随机分为4组．每组24只并分别腹腔注射不同药物。每日药物及剂量分别为：对照组(生理盐水30ml／kg)．苯巴比妥组(阳性对照组，75mg／kg)．茵栀黄组(30ml／kg)．地塞米松组(10mg／kg)。每天1次．连续注射3天、5天、7天。分别于设定时间末次注射后24h．每组每次各拉颈处死8只大鼠，摘取肝脏。

1.5 肝UDPGT活性测定 摘取肝脏后立即用生理盐水冲诜．定量滤纸吸干后取肝右叶0.5g．置5ml匀浆管中加入5ml／250mM蔗糖溶液(pH=7.40)．电子恒速搅拌仪匀浆3分钟(1200转／分)．制成10％(w／V)的肝匀浆。取10％肝匀浆lml．加2％洋地黄皂甙蔗糖溶液1mI(pH=7.4).即制备成已活化的酶待测标本。以上操作均在4 C以下进行.UDPGT活性测定参照Black法［1］.反应液组成为：0.17lμm胆红素，5μm氯化镁.20μm三乙醇胺一盐酸缓冲液(pH=7.4). 1.67μmUDPGA。加入200μl酶待测标本．置37C水裕恒温振荡器内孵育30分钟后．加入l m1甘氨酸一盐酸缓冲液(pH=2.8)终止酶促反应。室温放置5分钟，加入Iml偶氨试剂提取偶氯化台物．然后37 C振荡保温30分钟后取出．加入0．5ml7％抗坏血酸终止倜氯反应，并加入5ml二戊酮一乙酸丁酯混台液(85：l 5．V／V)．机械振荡30分钟以提取偶氮化色素(结台胆红素)．常温下1000g离心5分钟．取其上清液,以530nm波长比色测定吸光度。UDPGT活性单位以在37 C、每分钟每克肝匀浆蛋白催化生成的结台胆红素的μmol数表示：μmol，g protein／min。蛋白质测定采用Lowry氏方法［1］，牛血清蛋白为标准蛋白，

1.6 计算大鼠相时肝脏重量 按肝重／体重x100％计算肝／体重比。

1.7 统计学处理 采用华西医科大学研制的PEMA统计软件包作方差分析、q检验。