酶联免疫竞争法测定小分子药物时的酶标记物
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发布日期：2009-03-26 13:40 文章来源：<a href='http://www.dxy.cn'>丁香园</a>
关键词： 酶联免疫竞争法
小分子药物
酶标记物
点击次数：
发布日期：2009-03-26 13:40 文章来源：<a href='http://www.dxy.cn'>丁香园</a>
关键词： 酶联免疫竞争法
小分子药物
酶标记物
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随着政府对食品安全的检测额重视程度，越来越多的药物残留小分子检测试剂盒出现，酶联免疫竞争法试剂盒是其中的主力军，在采用酶联免疫竞争法检测小分子药物的模式中常用的方法有：
1. 包被抗原，酶标二抗进行的间接竞争法，该方法的好处在于对第一抗体不存在操作影响（没有认为的进行标记或其他处理），一抗活性好，并且抗原的包被一般不会出现过量包被造成IC50值较高，灵敏度降低的情况！但是该方法需要进行两次洗板操作过程麻烦，并且阴性OD值一半不会很高，多在2.0以下！线型范围较小，精确度较低！
2. 包被抗原，酶标一抗进行的标记抗体直接竞争法，该方法的好处在于操作简单，一步完成，包被一般不会出现过量包被造成IC50值较高，并且游离的抗原更容易和标记的抗体进行反应，灵敏度和精确度较高，阴性显色多在3.0以上。但是对于一抗进行标记难度较大，标记和后期纯化需要花费功夫！
3. 包被抗体，标记抗原进行的标记抗原直接竞争法，该方法的好处在于操作简单，一步完成，由于标记的抗原带有HRP相对游离的抗原与包被的抗体更容易结合，并且小分子标记后容易纯化分离，没有偶联的小分子通过透析即可除去，并且包被一抗对抗体的活性没有明显影响！但是该方法采用包被抗体的方法很容易造成包被过量影响IC50值，并且小分子的标记通常不能采用经典的过碘酸钠法，需要采用其他的化学方法，EDC。NHSEDC等，对酶的活性有一定的影响。
个人通过近期一些实验证明，直接竞争法IC50和线型范围明显优于间接竞争法，标记抗原和标记抗体相对来说标记抗原要稍好一些，关键在于后期纯化方便！抛砖引玉！！！希望大家能够针对此问题进行专题讨论！重点在于抗原抗体的标记，以及抗原的合成改造！
编辑: ludongcn 作者:lzsgxl