小鼠线栓法(MCAO)模型
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关于 大鼠线栓法(MCAO)模型
详见“雨后天晴 ”的手把手教你作大鼠线栓(MCAO)模型+灌注取脑+TTC染色http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=46&id=4224388&sty=1&tpg=1&age=0
具体步骤大鼠没有什么大差别,在这里我就不再细说了,
下面是我做小鼠的体会:
1、线栓的制备 分别取直径为0.128mm和0.104mm的两种鱼线,将其剪成2cm的线段,于1cm处标记,一端用固体石蜡融化包裹,用75%酒精清洁后置于蒸馏水中备用。
这是成功的关键,根据鼠的重量不同选 择线栓,一般20-30g用0.104mm,30g以上用0.128mm。
包裹很重要,我用的是石蜡,还有用其他材料的。
下面是我包裹好的线栓。要反复筛选,我的办法是,取一只小鼠把做好的线栓都插进去,粗的丢掉,并且线栓头部在手术显微镜看好,一定要包的均匀。
用5%的水合氯醛以3mg/kg麻醉小鼠并固定在手术台上,用镊子提起小鼠颈部皮肤,自胸骨柄到下颌骨间行1cm长的正中纵切口,暴露两个下颌下腺,将它们钝性分开,将右侧的腺体拉向旁侧,以暴露胸锁乳突肌,把小鼠移至解剖显微镜下,调节放大倍数至20倍,用自制拉钩拉开胸锁乳突肌肌腹,并固定,暴露肩胛舌骨肌,将肩胛舌骨肌钝性撕断,分离二腹肌下腹并用自制拉钩拉开固定,暴露颈动脉鞘,小心撕开颈动脉鞘,暴露颈总动脉并轻轻分离,小心不要损伤与之伴行的迷走神经,用4-0丝线环绕颈总动脉以作提拉用,分离颈外动脉向上分离至舌动脉和上颌动脉分叉处,在此处结扎、电凝并剪断颈外动脉,分离颈内动脉,用丝线环绕颈内动脉,将环绕颈内动脉和颈总动脉的丝线都结扎,以阻断血流,在颈外动脉远端的动脉壁上用BD针的针头扎一个小口,并将其拉向外后方与颈内动脉走行方向一致,将石蜡包裹的0.128mm和0.104mm鱼线通过小口插向颈总动脉分叉处,使其进入颈内动脉,一旦线进入颈内动脉,立即松开环绕颈内动脉的丝线,迅速将线栓送入颈内动脉,遇到轻微阻力后再次结扎颈内动脉的丝线,将下颌下腺归位,缝合皮肤,2h后实行再灌注,需要再次麻醉小鼠,将线栓拔出后电凝颈外动脉的缺口,取出结扎颈总动脉和颈外动脉的丝线,恢复血流并缝合皮肤。
应注意的几点:
1、做几个拉勾非常有必要,能省好多时间。
2、术前准备要充分。
我把纱布和脑棉剪成小块如图。
详见“雨后天晴 ”的手把手教你作大鼠线栓(MCAO)模型+灌注取脑+TTC染色http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=46&id=4224388&sty=1&tpg=1&age=0
具体步骤大鼠没有什么大差别,在这里我就不再细说了,
下面是我做小鼠的体会:
1、线栓的制备 分别取直径为0.128mm和0.104mm的两种鱼线,将其剪成2cm的线段,于1cm处标记,一端用固体石蜡融化包裹,用75%酒精清洁后置于蒸馏水中备用。
这是成功的关键,根据鼠的重量不同选 择线栓,一般20-30g用0.104mm,30g以上用0.128mm。
包裹很重要,我用的是石蜡,还有用其他材料的。
下面是我包裹好的线栓。要反复筛选,我的办法是,取一只小鼠把做好的线栓都插进去,粗的丢掉,并且线栓头部在手术显微镜看好,一定要包的均匀。
用5%的水合氯醛以3mg/kg麻醉小鼠并固定在手术台上,用镊子提起小鼠颈部皮肤,自胸骨柄到下颌骨间行1cm长的正中纵切口,暴露两个下颌下腺,将它们钝性分开,将右侧的腺体拉向旁侧,以暴露胸锁乳突肌,把小鼠移至解剖显微镜下,调节放大倍数至20倍,用自制拉钩拉开胸锁乳突肌肌腹,并固定,暴露肩胛舌骨肌,将肩胛舌骨肌钝性撕断,分离二腹肌下腹并用自制拉钩拉开固定,暴露颈动脉鞘,小心撕开颈动脉鞘,暴露颈总动脉并轻轻分离,小心不要损伤与之伴行的迷走神经,用4-0丝线环绕颈总动脉以作提拉用,分离颈外动脉向上分离至舌动脉和上颌动脉分叉处,在此处结扎、电凝并剪断颈外动脉,分离颈内动脉,用丝线环绕颈内动脉,将环绕颈内动脉和颈总动脉的丝线都结扎,以阻断血流,在颈外动脉远端的动脉壁上用BD针的针头扎一个小口,并将其拉向外后方与颈内动脉走行方向一致,将石蜡包裹的0.128mm和0.104mm鱼线通过小口插向颈总动脉分叉处,使其进入颈内动脉,一旦线进入颈内动脉,立即松开环绕颈内动脉的丝线,迅速将线栓送入颈内动脉,遇到轻微阻力后再次结扎颈内动脉的丝线,将下颌下腺归位,缝合皮肤,2h后实行再灌注,需要再次麻醉小鼠,将线栓拔出后电凝颈外动脉的缺口,取出结扎颈总动脉和颈外动脉的丝线,恢复血流并缝合皮肤。
应注意的几点:
1、做几个拉勾非常有必要,能省好多时间。
2、术前准备要充分。
我把纱布和脑棉剪成小块如图。
作者: qu_jing_dong 等
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