细胞培养的5个双抗相关问题
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发布日期: 2012-10-08 16:52 | 文章来源: 丁香园 |
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一、什么是双抗?
青霉素加上链霉素,俗称“双抗”。
二、如何配制双抗?
用20mL空针抽16毫升三蒸水(或PBS),溶160万单位/瓶的青霉素G钠一支,过滤除菌;用10mL空针抽10毫升三蒸水(或PBS),溶一支100万单位/瓶的硫酸链霉素一支,过滤除菌。分装至EP管中,-20度保存。使用前每100ml培养液加双抗各100ul-150ul即可。
细胞培养液双抗浓度:青霉素G钠,100-1000U/ml;硫酸链霉素,100-1000μg/ml(100万单位=1g)。
三、培养液中需要加入双抗吗?
加不加双抗不是绝对的,视实际情况而定。
如果你实验室条件足够好,如果你操作足够规范,就尽量不要加双抗了。
相反,如果你实验条件不够,操作也没有绝对把握,还是加的好。
最好的方法是做个实验对照,看有没有必要加双抗。
四、如何加双抗?
加在DMEM里,因为如果是直接在换液传代滴加的话,那个双抗的浓度实在不好控制,如果加多了话对细胞毒性太大,如果担心时效,可以Z在培养液配好后分装于100ml的小玻璃瓶中,在每启用一瓶之前加,加了之后应尽快用完。
五、双抗的保存
将双抗配制好,最好滤菌后再分装到EP管中,保存到-20度以下的冰箱。用时取一支,若一支没用完,可以立即保存到-20度继续再用,但反复冻融的次数不宜过多。
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