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15、取脑后在多聚甲醛中4c固定4－6小时，取材，脱水，包埋后可长期保存。

16、石蜡包埋后的样本。
                                           第三部分 TTC染色

1、原理：TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感复合物，1894年首次合成用来检测种子的生存能力，1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体，与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色，而缺血组织内脱氢酶活性下降，不能反应，故不会产生变化呈苍白。

2、取脑：可麻醉后直接取脑或经生理盐水灌注后取脑。因为脑组织未用多聚甲醛固定，所以较软，取脑时更应仔细，保持大脑的完整性。

3、-20度冰箱中速冻20分钟左右，便于切片。

4、切片：一般切成5－6片，每隔2mm切一片。第一刀在脑前极与视交叉连线中点处；第二刀在视交叉部位；第三刀在漏斗柄部位；第四刀在漏斗柄与后叶尾极之间。（参考：张均田，主编.现代药理试验方法）。如果需计算面积的话，应切的均匀或用专门的脑槽。

5、将切片置于TTC中，常规浓度为2%，也有用1%或更低浓度的。