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忙碌的时间总是在不经意间悄悄流逝，静下心来想想，第一次进医院实验室所发生的事情依旧历历在目，就像是刚昨天发生一般。

三个月前，导师把我们3个今年新招的研究生叫到了办公室，人手一份实验计划书。简单交代了几句，就带到了医院的实验室。就这样，我们的实验路程开始了。

实验室的条件比我们想象中要简朴的多，不过在这西湖边寸土寸金的地方，也从不敢奢求太多，如足够大的空间，足够先进的设备…对于这些我们只能面对，尽量去克服。进实验室的第一件事情就是把实验室里里外外打扫了一遍，这样可以尽量保证今后的实验可以在一个相对干净的环境内进行。

接下来就是各种实验耗材的采购了。我们的实验课题是关于脐带血间充质干细胞的分离培养诱导。毋庸置疑，间充质干细胞的培养是其中的关键。培养最重要的试剂毫无疑问是培养基。经过大量文献的阅读和丁香园上各位师兄师姐的指点，我们最终选定了stem cell公司。由于身边的同事同学之前并没有使用过贵公司的产品，在网上的仔细搜索后，查到了贵公司就是stem cell公司的中国代理，正好也在杭州。没有太多的耽搁，我们就联系上了贵公司的销售代表，顺利的订购了间充质干细胞基础培养基和添加物。

其他实验试剂也是这般，经过大量网上的搜索，我们一一顺利的购买到了我们实验所需的物品。

在各方面的准备到位之后，没有过多的休息，我们就开始了自己的实验。由于之前并没有独立进行过实验，仅仅在研一的理论课上学习过一些试验相关的知识。实验一开始，我们就遇到了各种各样的问题。但是问题并没有难倒我们， 我们几个人通过分工合作，逐一的解决了相关问题。

实验顺利的进行了几个星期，我们遭遇了一个突然的打击。在一天的细胞观察中发现，培养瓶的培养基明显变浑浊，在显微镜下观察，原本贴壁的成纤维样细胞大量脱落，漂浮在液体当中。这时我们才意识到是细菌污染了，经过鉴定，是睾丸酮丛毛单胞菌。为了尽量挽救细胞，我们对细胞进行清洗，换液，并加上了相克制的抗生素。但是，效果并不理想，细胞仍旧一天天的死去。无奈之下，我们只得选择放弃这批污染的细胞，重新开始。

经过大量资料的搜索，我们意识到了无菌操作的重要性。首先，对整个实验室进行了一次全面的消毒，接着是培养箱，无菌操作台。一一消毒灭菌处理。而我们自己，也一改以前毫不讲究的操作，尽量保证在无菌操作台里面保证做到无菌。很多细节很值得各位实验人员的注意：如每次进操作台操作，很多人只是简单的喷下酒精即可。但这远远不够，仔细洗手才是正确的做法。拿培养瓶和培养液时最好托下面拿，切记勿拿瓶颈部位。每次实验前需30分钟的紫外线照射，操作台里面的东西尽量少放。无菌操作时尽量避免说话，尤其是细胞房内的打闹说笑等。

诸如此类需要注意的地方很多很多，稍一疏忽就可能遗忘，这就需要我们平时操作时牢牢谨记，尽量把这样变成一种习惯。这样就可以尽量避免细胞污染，以免长时间心血白费。

避免细胞污染是养细胞很重要的内容，不过就算细胞没有任何污染也并不一定都能培养成功，仍有许多地方值得关注。例如：在细胞细化传代时最好是将胰酶放在37度水浴中温热10分钟，可以达到最好的消化效果，而且可以节省操作时间，吹打成单个细胞，减少对细胞的损害。每次添加胰酶的量不宜太多，盖住细胞即可。含EDTA的胰酶消化细胞时，要在胞质回缩，细胞之间不再连接成片，细胞尚未脱落时吸掉消化液并加入培养基，因为培养基并不能终止EDTA的消化。传代时细胞接种密度也不宜过低等。

我们的间充质细胞现在仍在培养过程中，目前观察情况良好，成纤维细胞贴壁较多。接下来等到细胞传到3 到5代时就需进行诱导分化。如分化成脂肪，成骨，神经细胞等。相应的诱导剂也需大量购买。经过查询，贵公司好像也有生产这类产品，我们也有意在贵公司购买。由于我们所做实验样本量较大，所以需要购买相当大量的贵公司产品。希望通过使用贵公司的产品可以帮助我们顺利完成现在以及今后的实验。我们所做的实验也仅仅是一个开始，以后我们身边的同事，同学会有更多的人投入到干细胞的相关实验研究中去。我们这个实验的成功进行相信也可以为他们带去宝贵的经验，我们也会向他们推荐贵公司的优秀产品。再次感谢贵公司可以生产出如此优秀的产品，也感谢贵公司提供这次平台，可以和大家分享几个月的实验经验，由于时间短暂，经验有限，希望大家谅解，谢谢！