RNA抽提细节系列
eagleeden：在论坛里混了很长时间，得到了很多帮助，特别是 上海孤儿 的无私奉献更让我感动。所以决定办一个RNA抽提细节的系列交流。为什么只谈细节呢？因为原理书上都有。当然这个系列主要是针对刚涉及RNA抽提的新手，老手免看，^_^.
刚涉及RNA抽提的新手都会听到别人说RNase很顽固，用高压灭菌都无法去除其活性。于是在配制tris缓冲液时就遇到了两难的境地。tris缓冲液不能用DEPC处理，只能用DEPC处理过的水配制，那么在药品称量、调pH值等过程中tris缓冲液会造到RNase的再次污染，所以是一个两难的境地。但是今天我要谈的是RNase并不顽固，高压灭菌可以去除其大量活性。
下面的实验照片（照片来自ambion）很清楚的显示了高压灭菌的效果。实验很简单，将不同含量的RNase用高压灭菌处理，然后与未高压灭菌处理的RNase一起来降解RNA（37度1小时），结果表明，当RNase的污染量小于100ng/ml时，高压灭菌可以去除其活性。这张照片还说明了一个问题，当你的RNA溶液中含有很微量的RNase污染时，不用过于担心，因为RNase对RNA的降解是需要时间的，更何况你的RNA是存放在低温下的。
讲得不好，请大家拍砖，但不要打脸哦，^_^
编辑: ludongcn 作者:eagleeden
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