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兔单抗亲和力和灵敏度更高
相对于鼠单抗（解离常数Kd在10-9-10-10M水平），兔单抗的亲和力可提高100-1000倍（Kd在10-10-10-12M水平）。实际使用时，兔单抗的工作浓度更低，灵敏度更高，因此产生的背景更低，大大降低了假阳性的发生。用作免疫组化等用途时，有时甚至可免去抗原修复的步骤。
兔单抗能识别更多表位
很多蛋白在人类和啮齿动物中同源性很高，这些保守表位在小鼠体内免疫原性很弱，不容易产生高质量抗体。而兔做为宿主，可以更好地识别这些表位，产生针对更多表位的抗体。当然，兔也适合生产针对鼠类蛋白的抗体。
免疫球蛋白提取技术
（二）操作方法
1．取血清加等量的0.1Mol/L ZnSO4液，调pH至7.0，室温搅拌1h，离心去沉淀。
2．于上清液中加入等量的饱和硫酸铵溶液，混匀后静置30min或冰箱过夜。
3．10 000r/min离心10min，去上清。
4．取沉淀溶于4ml10％EDTA－Na溶液中。
5．生理盐水中透析除盐。
6．过DE52柱，用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脱蛋白（IgG）弃去。
7．换用0.1Mol/L pH6.4PB液洗脱，收集蛋白峰，即为IgA。
8．再过SephadexG200柱，洗液为0.01Mol/L pH7.4PBS（0.14Mol/L NaCl），收集洗脱液测OD280值，取第一峰即为纯化IgA。
9．透析、浓缩、鉴定。
四、 分泌型IgA的分离与鉴定
（一）材料与试剂
1．初乳
2．SephadexG200
3．0.10Mol/L pH6.8PB液
4．0.01Mol/L pH7.4PB液
5．DEAE52
（二）操作方法
1．取初乳20ml，10 000rpm离心10min，弃去表面脂肪层及底部的沉淀物。
2．取乳清过SephadexG200柱（柱规格为2.50cm×90cm），以0.10Mol/L pH6.8PB液洗脱，第一峰为IgA（含IgG）。
3． 收集乳液，于0.01Mol/L pH7.4PB液中透析。
4． 将透析液浓缩至5mg/ml以上。
5． 过DE52层析柱，用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脱，洗下蛋白峰为IgG，弃去。
6． 换用0.10Mol/L pH6.8PB液或0.01Mol/L pH7.4PBS（0.10Mol/L NaCl）液洗脱，
收集洗脱液 ，即为较纯的IgA液。
7． 必要时，可再过一次SephadexG200柱。
8． 浓缩，鉴定
五、 禽IgA提取与纯化
（一）材料与试剂配制
1．禽胆汁
2．饱和硫酸铵溶液
3．0.01Mol/L pH7.4PBS液
4．0.10Mol/L pH6.4PBS液（0.30Mol/L NaCl）
5． DEAE52-纤维素
（二）操作方法
1．取冷藏的胆汁3Ⅹml，缓慢滴加Ⅹml饱和硫酸铵液，边加边搅拌，使成25％饱和硫酸铵液。4℃放置30min。
2． 3 000r/min离心30min，去沉淀。
3． 取上清，加饱和硫酸铵液，使成35％的饱和度，4℃放置30min。
4． 3 000r/min离心30min，弃上清。
5． 取沉淀，加0.85％NaCl液溶解，加饱和硫酸铵溶液，重复步骤3和4三次。
6． 将沉淀用0.85％NaCl液溶解，装入透析袋，以0.01Mol/L pH7.4PBS液透析。
7． 以0.01Mol/L pH7.4PBS液平衡，过DEAE52纤维柱（20×250mm）。
8． 取透析样品4ml(﹥20mg/ml蛋白浓度)加入层析柱。以0.01Mol/L pH7.4PBS液洗脱。
9． 再用0.10Mol/L pH6.4PBS液（NaCl浓度为0.30Mol/L）洗脱，收集洗脱液。
10．浓缩洗脱蛋白液至20mg/ml，分装，低温冰箱保存。
六、 IgE的分离与提纯
（一）材料与试剂
1．血清
2．饱和硫酸铵溶液
3．洗脱液0.005Mol/L pH7.4PB液
0.025 Mol/L pH7.4PB液
0.01Mol/L pH7.4PBS液(0.14mol/L NaCl)
4．DE52
5．SephadexG150
（二）操作方法
1．取血清倍比稀释后，加等量饱和（NH4）2SO4溶液，盐析。
2．离心取沉淀，溶于少量生理盐水中，透析、除盐。
3．过DE52柱，以0.005Mol/L pH7.4PB液洗脱，收集洗脱蛋白峰(IgG)，弃去。
4．换以0.025Mol/L pH7.4 PB液洗脱，洗下的蛋白峰主要是IgE。
5．透析除盐。
6．过G150柱，以0.01Mol/L pH7.4PBS(0.14Mol/L NaCl)洗脱，收集洗脱液即为纯化的IgE。
7． 浓缩、鉴定。
编辑: wangminchao
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