你知道吗？ 详细 >>
兔单抗亲和力和灵敏度更高
相对于鼠单抗（解离常数Kd在10-9-10-10M水平），兔单抗的亲和力可提高100-1000倍（Kd在10-10-10-12M水平）。实际使用时，兔单抗的工作浓度更低，灵敏度更高，因此产生的背景更低，大大降低了假阳性的发生。用作免疫组化等用途时，有时甚至可免去抗原修复的步骤。
兔单抗能识别更多表位
很多蛋白在人类和啮齿动物中同源性很高，这些保守表位在小鼠体内免疫原性很弱，不容易产生高质量抗体。而兔做为宿主，可以更好地识别这些表位，产生针对更多表位的抗体。当然，兔也适合生产针对鼠类蛋白的抗体。
抗体的提取与纯化
（三）试剂和器材
（1）TSK DEAE SPW离子交换层析柱 （75mm×7.5mm,Bio Rad）
（2）高效液相色谱仪（包括控制系统、溶剂传递系统、高压加压活门和紫外280nm监测系统）
（3）PBS，缓冲液A和B。
（四）注意事项
（1）所用缓冲液和加样粗提物均需0.2μm滤膜过滤。
（2）在本实验条件下，IgG1峰一般在线性梯度洗脱开始11-12min。但不同类和亚类抗体以及不同特异性McAb的存留时间（retention time）有所差异。
【附录】
制备单克隆抗体常用的试剂
1．RPMT-1640培养液 其中含2mmol/L 谷氨酰胺，25mmol/L Hepes,5×10-5mol/L2-巯基乙醇
2.RPMT-1640完全培养液 上述溶液加10%～20%灭活小牛血清
3．HT母液×100
次黄嘌呤（H）1.0×10-2mol/L 136.1mg
胸腺嘧淀核苷(T) 1.6×10-3mol/L 38.8mg
蒸馏水 100ml
4. A母液×100
氨基喋呤(A) 4×10-3mol/L 1.76mg
蒸馏水 90.0ml
1mol/L NaOH 0.5ml
溶解后,加1mol/L HCl 0.5ml,再补加蒸馏水至100ml 。
5．HAT选择培养液
RPMI-1640培养液 80ml
灭活小牛血清 20ml
HT母液×100 1ml
A母液×100 1ml
用5%NaOH调节 pH至7.4左右。
6．HT培养液
RPMI-1640培养液 80ml
灭活小牛血清 20ml
HT母×100 1ml
用5%NaOH调节 pH至7.4左右。
编辑: wangminchao
以下网友留言只代表网友个人观点，不代表网站观点
