丁香园 | 丁香通 | 人才 | 会议 | 药学 | 博客  
 点击次数:

你知道吗? 详细 >>

兔单抗亲和力和灵敏度更高
相对于鼠单抗(解离常数Kd在10-9-10-10M水平),兔单抗的亲和力可提高100-1000倍(Kd在10-10-10-12M水平)。实际使用时,兔单抗的工作浓度更低,灵敏度更高,因此产生的背景更低,大大降低了假阳性的发生。用作免疫组化等用途时,有时甚至可免去抗原修复的步骤。

兔单抗能识别更多表位
很多蛋白在人类和啮齿动物中同源性很高,这些保守表位在小鼠体内免疫原性很弱,不容易产生高质量抗体。而兔做为宿主,可以更好地识别这些表位,产生针对更多表位的抗体。当然,兔也适合生产针对鼠类蛋白的抗体。

大鼠和小鼠尾静脉注射技巧与心得

转载请注明来自丁香园
发布日期:2012-04-27 10:51 文章来源:丁香园
分享到: 收藏夹 新浪微博 腾讯微博 开心网 豆瓣社区 人人网
关键词: 丁香通 生物专题 义翘神州 大鼠 小鼠   点击次数:

一、将小鼠固定好,将尾巴拉直,绷紧

小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。

或者用这个方法

1、 小鼠要固定好,自制一个笼子,前面通气,中间最好有一个挡板,让小鼠不能后退,筒子后面开一个口,尾巴从这里出来,这样固定牢靠

2、注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟,有利于注射

3、先远后尽,不要一开始就从尾根部,那样失败了不好办

4、进血管后注意保持稳定,针尖很容易刺穿血管的。至于能否穿进,个人手感如何,全靠自己啦。多练习,一定很快掌握的,不难,绝对不难!练习10余只小鼠就比较熟练了

二、用酒精棉球擦拭尾巴,使血管扩张

或者用热水或者热毛巾焐热,使静脉扩张;选用适当的针头,越细越好;在尾部较靠近上段的地方注射,这里血管比较大。用酒精或热水擦拭,擦拭的时候,可把尾巴用力扯在桌面上。注射状态为尾巴发白,紧靠白色的尾骨两侧清晰可见两根红色静脉。

三、用左手的食指,中指,无名指及大拇指将小鼠尾巴固定

手法:握住1ml注射器前面0.1ml处。右手小指搭在拽着鼠尾的左手拇指处按此手形进针;看针尖前面那个斜面有3/4(关键),如果血管充盈则进1/2,进入,停,上挑针头,进针;左右轻摆动,如可动,可注射。

原则是:把你第一次打进的手形,完全固定下来,每次都重复。

四、注射技巧

注射时左手扯尾,使尾巴紧贴桌面,尾巴与桌边紧贴转弯处为进针部位,一般选择距尾尖1/4或1/3处进针,此处皮肤较薄,血管清晰,进针容易。进针时针头与桌面平行,针尖稍稍朝下,从中指及无名指与拇指接触处稍上方进针,一旦进入,须将针头稍稍上挑进入,针头沿血管进入,肉眼可关察到针头前进。如果针头在血管中前进,可明显地感觉到针行通畅,毫无阻力。若针头不在血管中,手感针行有阻力,有一种堵的感觉。进针时不要太深,针头入皮肤后马上把针头略往上,平行进针,针扎入时有落空感,推液时无阻力则说明成功了!如针头处出现皮丘则说明在皮下,推出重来。进针处最好在尾巴的1/3-1/2处,甚至可以更下一点。这样一次失败了还可以往上再来,不要马上在最高处打,因为你们要打这么多天。要为以后作准备。用热水、酒精、红外都可以扩张血管。可以视情况而用。总而言之,最重要的是“熟能生巧”。你最好先练习一下或请高手相助。不然到了最后几天,真的很难打的。

注意:针进入后,切记手不可发抖,因为血管壁非常薄,容易扎穿。推药时,要缓推。若进针成功,推药顺畅,无阻力;若推药时感觉有阻力,说明针头不在血管中,须及时拔出,重新进针。一般选用4号或4号半针头。最好用打疫苗的2毫升一次性注射器。尾静脉注射并不难,主要是一种感觉。若用上十只鼠练手,你必会找到感觉。心要静,手要稳,要有耐心。我研一的时候尾静脉注射让我头疼万分,越急越打不进去。后来静下心来,边注射边找感觉,很快就熟练了。

五、通过看有无回血来测试针是否在静脉内

六、注射

做到以上步骤,保证注射成功!

七、注意

1、如果做细胞移植时,应该尽量把细胞打散,不然很容易引起栓塞!

2、练习:建议你先用蓝墨水练手,因为新手往往看不出打入的是皮下还是静脉

其实真的只能熟能生巧一般推荐在尾下1/3处进针,但是1/2处准确度较好,针头可以插深入些,防止意外摆动戳破静脉而注入皮下,很多时候觉得进了血管打的却是皮下,就是因为这个原因。

或者用:经常尾经脉注射胎盘兰,比较容易,静脉在侧面比较粗的那个,可以做个容器,用一个50ml的离心管前面弄个开口,后面的螺盖弄个洞,把老鼠装进去,比较容易,把都对准管小鼠自动进去,把尾巴从盖子的洞穿出来,操作极为方便。刮毛,用热水烫一下,血管涨起来就可以,具体的感觉还要自己实践一下掌握,不过还容易,有3-4只就可以掌握。

3、规律:动物越小越好操作,小鼠比大鼠容易,幼年大鼠比成年大鼠容易;对于小鼠最好还是尾静脉注射,这样损伤最小;成年大鼠实在不行可以选股静脉注射,相对要容易一些;最重要的一点,必须多练,进针时的那种感觉必须自己好好体会,熟能生巧,这是常识。

编辑: wangminchao

以下网友留言只代表网友个人观点,不代表网站观点