间充质干细胞
1. 间充质干细胞
来源于发育早期的中胚层和外胚层。MSC最初在骨髓中发现,因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。如间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下,可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞,连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能,可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。
2. 间充质干细胞的特性:
2.1. 具有强大的增殖能力和多向分化潜能,在适宜的体内或体外环境下不仅可分化为造血细胞,还具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力。
2.2. 具有免疫调节功能,通过细胞间的相互作用及产生细胞因子抑制T细胞的增殖及其免疫反应 ,从而发挥免疫重建的功能。
2.3. 具有来源方便,易于分离、培养、扩增和纯化,多次传代扩增后仍具有干细胞特性,不存在免疫排斥的特性。
2.4. 面目模糊,表面抗原不明显,异体移植排异较轻,配型要求不严格。
目前, 我们能够从骨髓、脐带、胎盘、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉、肺、肝、胰腺等组织以及羊水、脐带血中分离和制备间充质干细胞。
间充质干细胞的培养形态:
90%-100%融合 80%融合
间充质干细胞的表型:
3. 典型的人MSC分离方法:
脐带华通氏胶MSC分离方法
将脐带华通氏胶的一条静脉,两条动脉分离后,用力将华通氏胶从外膜层上撕下,然后剪碎成0.5 ~ 1.5 mm3 的组织块,加入胶原酶I,置37 ℃恒温振荡培养箱振荡消化后,用滤网过滤,将滤过的细胞悬液离心洗涤。用培养液混匀细胞,以一定量的细胞接种于培养瓶中,置37 ℃、饱和湿度、5% CO2培养箱中培养。待细胞从组织块中爬出后(这个过程需一周至两周,依组织块的大小以及分离方法而定),每隔3~4 d 换液。融合至80%~90%传代培养,传代时,加入胰酶消化2分钟左右,待梭型细胞大部分脱离培养皿底部,且形态变圆终止消化。
骨髓操作方法
用FICOLL分离出单个核细胞后直接培养。
4. 相关产品
RosetteSep(分离用)、MesenCult(人、小鼠)、MesunCul-XF(无异种)等
无异种成分培养优点:
无血清配方
无动物成分
可维持细胞多向分化潜能
细胞生长速度更快
可减少造血细胞的污染
减少了实验间的批次差异
编辑: gaowei2010