四聚体概述
抗原特异性T细胞在细胞免疫应答中发挥着核心作用,因此定量测定抗原特异性T细胞数量在判定机体细胞免疫功能方面提供重要的信息。传统的抗原特异性T细胞功能检测方法有经典的Cr51释放试验、有限稀释法(LDA)、酶联免疫斑点试验(ELISPOT)和细胞因子胞内染色(ICS)等,但是这些方法或多或少都存在操作繁琐、耗时长、重复性差等缺点。根据抗原特异性T细胞上TCR与MHC-多肽复合物特异结合的原理,可以利用Tetramer技术检测抗原特异性T细胞。虽然MHC-多肽单体能与TCR结合,但其亲和力低,解离速度很快,因而不能直接用于特异性T细胞的检测。为解决这一问题,Altmen等于1996年首创了MHC-多肽四聚体技术。其具体原理是借助生物素-链霉亲和素系统,将MHC-多肽复合物四聚化,单个MHC-多肽四聚体分子可与细胞表面的多个TCR结合,从而大大提高了MHC-多肽复合物与TCR的亲和力和稳定性,便于利用流式细胞仪进行检测。与其他技术相比,该技术具有迅速、直接检测抗原特异性T细胞的优点,且灵敏度高,特异性强。即使当体内抗原特异性T细胞水平低于1%,用此技术仍可准确测定其数值。
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编辑: gaowei2010