3D 细胞培养专题

台湾加乐生医股份有限公司，是台湾第一家研发最新的三维体外细胞培养材料的公司。产品使细胞呈三维立体形态生长，使细胞的生长更接近真实现象，表现出细胞 间的交互作用，适于培养一般细胞、代谢细胞、干细胞等。现已商品化的产品有3D CelluSponge及GO Matrix， CelluSponge可键结不同物质（普通型、包被半乳糖型以及包被胶原蛋白型）来培养难培养的细胞。用于药物测试、观察代谢情况或其他异变情形。尤其 在肝脏细胞研究方面成果丰硕，应用培养出的微型肝组织结构来预测药物在体内的反应，可帮助早期药物开发、毒性检验、癌症组织药效测试、蛋白制药、缩短干细 胞定向分化时间、干细胞研究与组织工程，再生医学等。

产品特点：
1. 便于操作，适用于2D细胞培养步骤；
2. 突破水凝胶材质，采用植物纤维，有效增加细胞间连接，利于营养与废物的扩散；
3. 细胞兼容性高，免疫反应低，降低了载体的干扰因素，有效地提高细胞培养实验的准确度和可重复性；
4. 支持细胞团适度生长，防止细胞团中心的细胞凋亡
5. 可用于低温保存细胞，维持3D球体
6. 短时间达到理想聚合且适合长期培养
7. 对药物吸收度低，适于多种药物测试和药物早期筛选

3D CelluSponge系列产品：
Cellusponge: 适用于无需特殊配体培养的一般细胞及癌细胞系的培养
Cells scope: cancer cell lines（e.g. MCF-7 & MDA-MB系列）;mouse fibroblasts NIH3T3; human foreskin fibroblast HFF
CelluSponge-Galactose：特殊干细胞、原代肝细胞或肝癌细胞系的培养
Cells scope: primary hepatocytes, hepatocyte cell lines: HepG2,C3A & Huh7.5
应用：体外的药物安全检测、肝炎病毒的侵染和复制的3D 细胞培养模型，肝细胞分化的研究。
CelluSponge-Collagen：神经细胞、干细胞、原代细胞以及心肌细胞培养
Cell scope: mouse and human embryonic stem cells (mESC & hESC), human    mesenchymal stem cells(hMSC), cardiomyocytes,
应用：心肌细胞的长期3D培养，mESC & hESC细胞的分化。

操作指南（多孔板形式）

1. 制备细胞悬液：细胞密度一般为3×105/60ul（针对Huh7.5细胞和鼠/人原代干细胞，对于其他类型细胞，细胞密度可据情况有所变动）。
2. 在多孔板的每个孔中心滴加30ul的细胞悬液。
3. 将CelluSponge置于细胞悬液的上方（不需提前润湿CelluSponge），培养细胞直接接种于干燥的CelluSponge上即可。（请一定要预留一些时间，使培养基被CelluSponge充分吸收）。
4. 在CelluSponge的上端再加30ul的细胞悬液，确保CelluSponge的两侧细胞接种均一。
5. Huh7.细胞和鼠/人原代肝细胞分别孵育各45min和30min。（这步可去除CelluSponge中的小气泡）。
6. 孵育30-45min后，在每个孔中加500ul的培养基。培养基勿直接加到CelluSponge上，要从每个孔边缘缓慢加入。
7. 过夜孵育后，将接种好的sponge转移至新的板中，补充培养基继续培养。
注意：细胞接种也可以将细胞悬液直接滴在干CelluSponge任意一面接种。

编辑： snail    来源：丁香园