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转盘式碟片共聚焦的特点

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发布日期:2011-09-07 17:39 文章来源:丁香园
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关键词: 成像 生物 专题 转盘式   点击次数:

碟片共聚焦包括多组呈螺旋形分布的高密度针孔(总数约2万个),安装在物镜的像平面上.激发光通过真空和物镜聚焦到样本的 离散的点上,碟片高速旋转,每秒钟可以照射标本几百次,实现扫描区域内由 无数个点组成的场照明,使样本同时被激发.发射光通过物镜和碟片上针孔与激发光照射点共轭,消除非焦面上的杂散光, 投射到目镜或CCD上,有效地生成实时焦平面图像,通过高分辨率-高灵敏度Cooled CCD采集图像.

1、转盘式碟片共聚焦和普通共聚焦、普通显微镜的关系

普通显微镜,指宽场成像显微镜,所谓宽场成像就是“面成像”,所谓面成像就是一个时间点获得一整个二维图像,这是与明显区别于扫描成像显微镜的,如共聚焦显微镜。共聚焦显微镜是“点成像”,即每个时间点只能获得一个空间信息,通过不断花费时间去扫描最终获得整个二维或三维图像,因此扫描成像每个像点不是一个时间点,不管扫描速度有多快。目前市场的碟片共聚焦,属于二者综合性,因为使用多孔碟片,在一个时间点就可以多获得几个空间点信息,但是整个图像也不是一个时间点到,部分空间信息是一个时间点到。

2、转盘式碟片共聚焦和普通共聚焦的主要区别:

1)光源不同,激光共聚焦有激光做光源,可以做比如光漂白恢复实验和感兴趣区域扫描,碟片式一般用普通汞灯或氙灯,成本低了,但不能做如光漂白恢复实验感兴趣区域扫描,不过也有用激光的,例如PE的碟片

2)针孔不同,激光共聚焦一般是单针空,且针孔可以调节大小,碟片的多针孔,上千个,但不能调节大小.

3)分辨率的差别:激光共聚焦的分辨率一般要大于碟片,但碟片的速度一般要比激光共聚焦快.

4)成像速度:这是二者最大的区别,普通共聚焦在全分辨率下每秒呈3-5幅图,而转盘式碟片共聚焦可以达到上百幅,因此它最大的特点是速度快,灵敏度高,光漂白和光毒性水平低,适合活细胞、快速、3D扫描研究。

编辑: helen

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