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2、金免疫渗滤分析

（1）试剂盒：渗滤装置为一充满吸水垫料的塑料小盒，在盒盖中央的小孔下面放置了一片硝酸纤维素膜，膜上预包被抗原或抗体斑点。

（2）反应模式：间接法、夹心法、捕获法、竞争法。

间接法：抗原固定于膜上→标本（抗体），洗涤→金标二抗。

夹心法：抗体A固定于膜上→标本（抗原）→金标单抗B。

捕获法：在固相载体上包被二抗→样品（待测抗体）→抗原→金标单抗。

竞争法：在载体上包被抗体→加入待测抗原→加入标记抗原

3、金免疫层析分析和金免疫渗滤分析的比较

（1）相同点：检测原理相同。以微孔滤膜为载体，滤膜的毛细管作用促进抗原抗体结合反应，通过胶体金结合物达到检测目的。

（2）不同点：

硝酸纤维素膜的种类、形式及组成方式。金免疫层析分析为狭长形膜，由4部分组成，依次是吸水纸、玻璃纤维素膜、硝酸纤维素膜、吸水纸。金免疫渗滤分析为圆形硝酸纤维素膜及底层的吸水垫料。

标记配体的形式。金免疫层析分析为固相形式，金免疫渗滤分析为液相形式。

液体的移动方向。金免疫层析分析是通过层析作用的横向流动，金免疫渗滤分析是通过垂直穿透固定有配体的硝酸纤维素膜而进行。

操作步骤。金免疫层析分析大多只有加样一个步骤；金免疫渗滤分析有加样、洗涤、加标记配体等。

4、金免疫层析分析和金免疫渗滤分析特点

（1）单份测定，试剂和样本用量极小，样本量可低至1～2ul。

（2）不需任何检测仪器，适于现场应用。

（3）没有诸如放射性同位素、邻苯二胺等有害物质参与。

（4）实验结果可以长期保存。

（5）检测速度快，几分钟即可用肉眼观察结果。

5、胶体金免疫结合试验在临床检验中的应用

主要用于检测正常体液中不存在的抗原性物质、正常人含量极低而在特殊情况下异常升高的物质。

（1）激素。早早孕诊断试剂人绒毛膜促性腺激素，检测尿液。

（2）传染病病原的抗原和抗体。肝炎病毒、艾滋病病毒抗体等。

（3）性病病原：梅毒螺旋体抗体、淋球菌等。

（4）细菌：结核杆菌抗体、胃幽门螺杆菌抗体等。

（5）寄生虫：弓形虫抗体、血吸虫抗体等。

（6）肿瘤标记物：前列腺癌特异抗原（消化道恶性肿瘤尤其是结肠癌）、甲胎蛋白（肝癌）

（7）心血管病检测标志物：血清心肌肌钙蛋白、肌红蛋白和肌酸激酶同工酶，诊断急性心肌梗塞。

（8）其他蛋白质：甲状腺微粒体抗体（桥本甲状腺炎）

（9）其他：血糖、尿糖及尿液中吗啡和海洛因等。

6、金免疫结合试验的发展前景

（1）进一步提高检测灵敏度。采用信号放大系统如生物素亲和素系统或免疫金银染色法，并结合一些相应的简单检测仪器。

（2）实现检测多元化。在同一膜上作多种项测定，检测某些具有联检意义的物质。

（3）实现定量或半定量检测。

GIFA可用反射光密度计对斑点颜色的强度进行测定，可得到半定量的结果；控制受体捕获量：固定多种不同量的受体，在膜上包被多条反应线，观察各自显色情况，将待测物含量确定于某一浓度区间。

（4）通用试剂的应用。

胶体金标记葡萄球菌蛋白A代替抗人IgG标记物；链亲和素可作为通用固定受体，与各种生物素化抗体结合用于检测相应的抗原性物质。