动物转基因技术的关键技术
转基因动物的关键技术包括：
1.外源目的基因的分离
2.外源目的基因与转性基因表达启动子、增强子、报告基因等构件的拼接重组
3.重组DNA导入生殖细胞或胚胎干细胞
4.胚胎移植技术
5.鉴定及筛选
6.目的基因整合率及表达效率的检测
一、显微注射法
1. 目的基因的制备
2. 小鼠的准备和要求
3. 受精卵的分离
4. 显微注射
5. 受精卵的移植
6. 转基因小鼠的鉴定
二、逆转录病毒法
1. 原理：
逆转录病毒的核酸为一条单链RNA分子，其基因由两部分组成，一是顺式作用序列，为病毒复制和整合所必需；二是反式作用序列，编码病毒的包装蛋白。将外源基因取代反式作用序列构建成重组载DNA。
另外将包装蛋白基因导入专门的细胞并使之整合到染色体上，形成包装细胞。
如果重组病毒DNA导入这种包装细胞中，病毒包装蛋白能将DNA包装成具有感染力的重组蛋白颗粒，能浸染动物细胞而将重组DNA引入宿主细胞。
2. 步骤：
（1）逆转录病毒载体的构建
（2）选择和培养包装细胞系
（3）重组病毒DNA导入包装细胞
（4）收集重组病毒颗粒
（5）感染胚细胞，使细胞转化
此法是目前制备转基因鸡最有效和最成功的方法。
编辑: ludongcn 作者:丁香园通讯员
以下网友留言只代表网友个人观点，不代表网站观点
