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HTRF术语详解 详细 >>

FRET：指荧光共振能量转移，在供体和受体相互靠得很近时，光子能从一个受激发的荧光团（供体）转移到另一个荧光团（受体），并使后者发出荧光。

HTRF：均相时间分辨荧光，Homogeneous Time-Resolved Fluorescence ）是用来检测纯液相体系中待测物的一种常用方法。

背景（Background）：指在没有加入compound时检测到的信号值。

荧光受体（acceptor）：指在荧光团受到激光激发时，能发出特定波长的发射光的基团。HTRF®的能量受体均可为XL665和d2。

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实验材料准备

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发布日期：2011-10-11 17:38 文章来源：Cisbio
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关键词： 丁香园 生物专题 htrf 细胞 生化 　 点击次数：

细胞实验(Cell Based Assays)

· 材料准备

- HTRF试剂（盒）
      - 细胞
      - 化合物
      - 微孔板 （http://www.htrf-china.com/technology/assaytips/microplate/）
      - 酶标仪 （http://www.htrf-china.com/technology/htrfmeasurement/compatible_readers/）
 

· 实验准备

A  Aspirate growth media
      B  Add cell dissociation buffer
      C  Collect cell suspension
      D  Centrifuge at 1000rpm for 5min
      E  Aspirate cell supernatant
      F  Add DMEM with IBMX (final concentration at 500 uM) to resuspend cell pellets
      Add cells 5ul/well to the plate (the final cell concentration should be optimized here before screening).
 

生化（激酶）实验(Biochemical Kinase Assays)

· 材料准备

      - HTRF试剂（盒）
      - 激酶 (蛋白)
      - 化合物
      - 微孔板（http://www.htrf-china.com/technology/assaytips/microplate/）
      - 酶标仪（http://www.htrf-china.com/technology/htrfmeasurement/compatible_readers/）
      - 其他试剂 （ATP, MgCl2/MnCl2, DTT, etc）

· 实验准备

激酶分装成小管

 

 

编辑: cq

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