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FRET：指荧光共振能量转移，在供体和受体相互靠得很近时，光子能从一个受激发的荧光团（供体）转移到另一个荧光团（受体），并使后者发出荧光。
HTRF：均相时间分辨荧光，Homogeneous Time-Resolved Fluorescence ）是用来检测纯液相体系中待测物的一种常用方法。
背景（Background）：指在没有加入compound时检测到的信号值。
荧光受体（acceptor）：指在荧光团受到激光激发时，能发出特定波长的发射光的基团。HTRF®的能量受体均可为XL665和d2。
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GPCR领域的应用
在GPCR方面主要产品有cAMP检测试剂盒、IP-One检测试剂盒、Cellul'erk检测试剂盒。
●cAMP检测试剂盒
a) Cisbio cAMP assays实验设计原理：cAMP assays针对的是与Gi、Gs蛋白结合的GPCR，该方法测定的对象是细胞内cAMP的浓度。Gi蛋白在与GPCR结合后，会抑制腺苷酸环化酶（AC）的活性，从而造成细胞内cAMP浓度的下降。Gs蛋白则相反，它在与GPCR结合后，通过第二信使通道能激活AC的活性，导致细胞内cAMP浓度的上升。所以通过测定一定条件下的细胞内cAMP浓度便能推断出GPCR是否已经与G蛋白结合。
b) CAMP检测试剂盒分3类（具体选择哪个，请致电Cisbio技术支持）
●cAMP Femto检测试剂盒: Femto系列针对的cAMP浓度相对较低的试验
●cAMP Dynamic检测试剂盒：Dynamic系列较为常用，其适用的cAMP浓度适中
●cAMP HiRange检测试剂盒：HiRanger系列针对的cAMP浓度较高的试验
c) cAMP检测试剂盒的优点
●最稳定的cAMP检测试剂盒，可重复性强，业内深受肯定
●方法简单，操作快，即使高通量也不耗时
●兼容多种读板仪，无需额外购买仪器
●Cisbio IP-one检测试剂盒
a) Cisbio IP1 assays实验设计原理：IP-1 assays针对的是与Gq蛋白结合的GPCR，该方法测定的对象是细胞内IP1的浓度。当Gq蛋白与GPCR结合后，这会引发细胞内瞬时大量IP3和瞬时的钙离子。然而，IP3在细胞内停留时间十分短，会很快被代谢成IP2和IP1。当培养基中有LiCl存在时，细胞内IP1的降解会受到抑制，并在细胞内稳定存在。通过检测IP1的浓度变化便能了解Gq是否与GPCR相结合。
b) IP-one检测试剂盒的优点
●可用于检测钙流通路（Gq），且不必进行瞬时浓度检测
●稳定，可重复性强
●方法简单，操作快，即使高通量也不耗时
●兼容多种读板仪，无需额外购买仪器
●Cellul'erk检测试剂盒
a) Cellul'erk检测试剂盒设计原理：在抗磷酸化ERK1/2的抗体和抗ERK1/2的抗体上分别标记d2和Eu, 把两种抗体加入待测样品中，当样品中含有磷酸化ERK1/2时，两个抗体就会以夹心法的方式结合上去，检测时就会产生HTRF信号。从而根据信号的强弱来判断待测样品中的磷酸化ERK1/2的多少。
b) Cellul'erk检测试剂盒的特点
●实验方案很简单，易于操作，可以替换部分Western和Elisa
●基于抗体的实验
●均相并且直接检测
●HTRF的结果很稳定，灵敏
●适用于研究内源表达和过表达的受体
●适用于包括原代细胞内的很多细胞
●试剂盒里包含了所有试剂
编辑: cq
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