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HTRF术语详解 详细 >>

FRET:指荧光共振能量转移,在供体和受体相互靠得很近时,光子能从一个受激发的荧光团(供体)转移到另一个荧光团(受体),并使后者发出荧光。

HTRF:均相时间分辨荧光,Homogeneous Time-Resolved Fluorescence )是用来检测纯液相体系中待测物的一种常用方法。

背景(Background):指在没有加入compound时检测到的信号值。

荧光受体(acceptor):指在荧光团受到激光激发时,能发出特定波长的发射光的基团。HTRF®的能量受体均可为XL665和d2。

cAMP检测实验的一般实验流程

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发布日期:2011-10-18 16:25 文章来源:Cisbio
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关键词: 丁香园 生物专题 htrf cAMP检测   点击次数:

实验准备:

      1. HTRF cAMP检测试剂盒
      该系列试剂盒含有(以cAMP Dynamic产品为例):
      1) Anti cAMP - Cryptate
       2) cAMP-d2
      3) cAMP standard. Concentrated free cAMP
       4) cAMP control. Free cAMP assay control
      5) cAMP & cGMP conjugates & lysis buffer
      6) Diluent

      2. 实验所需的细胞
 

一般试验流程(一步实验法):

      1. 细胞解冻
      2. 按试剂盒说明,调制部分HTRF试剂
      3. 添加细胞及HTRF试剂(cAMP d2 conjugates)
      4. 室温孵化(Incubation)约半小时
       5. 添加HTRF试剂(Cryptate conjugates in lysis buffer)
      6. 室温孵化(Incubation)约1小时
      7. 送入读板仪读板(read

 

具体实验背景、实验描述及注意事项,点此下载 protocol进一步阅读。

编辑: cq

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