HTRF术语详解 详细 >>
FRET:指荧光共振能量转移,在供体和受体相互靠得很近时,光子能从一个受激发的荧光团(供体)转移到另一个荧光团(受体),并使后者发出荧光。
HTRF:均相时间分辨荧光,Homogeneous Time-Resolved Fluorescence )是用来检测纯液相体系中待测物的一种常用方法。
背景(Background):指在没有加入compound时检测到的信号值。
荧光受体(acceptor):指在荧光团受到激光激发时,能发出特定波长的发射光的基团。HTRF®的能量受体均可为XL665和d2。
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Insulin检测实验的一般实验流程
实验原理图:
实验准备:
1. HTRF Insulin检测试剂盒
该系列试剂盒含有(以HTRF Insulin产品为例):
1) Anti-insulin-Ab-cryptate
2) Anti-insulin Ab-XL665
3) Insulin standard
4) Insulin control
5) Reconstitution buff er (50 mM phosphate buff er, pH7.0, 0.8M KF)
6) Diluent
2. 实验所需的细胞
3. 实验板(assay plate)
一般试验流程(Supernatant assay):
1. 按试剂盒说明,调制部分HTRF试剂
2. 添加细胞和其他激活剂
3. 室温孵化(Incubation)并把上清液转移至实验板(assay plate)
4. 孵化(Incubation)
5. 添加HTRF试剂(Anti-insulin-XL665与Anti-insulin-Cryptate)
6. 送入读板仪读板(read)
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编辑: cq