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单克隆抗体中建立ELISA方法的注意事项

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发布日期:2009-03-26 13:51 文章来源:丁香园
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关键词: 单克隆抗体 ELISA 注意事项   点击次数:

半数抑制:指用药物(半抗原)去做竞争实验时呈现50%抑制效果时的药物浓度。药物浓度越低,而抑制率越高,则表示抗体对药物的特异性越好,灵敏度也高。半数抑制浓度IC50对应的OD值:OD IC50=0.5?B0

检测下限(LOD)对应的OD值:ODLOD =B0-3SD;

定量限(LOQ)对应的OD值:ODLOQ = B0-10SD;

3、间接ELISA操作中具体注意的问题:

间接ELISA一般有6个步骤:包被抗原、封闭、加一抗(在做竞争时同时加入药物)、加二抗、显色、终止。其中除了加显色和终止外,其余步骤之间都要进行洗板。在这里面,每一步都非常重要,假如有一步疏忽都会造成结果的不准确。通常ELISA结果会出现如空白显色、阴性偏高、方阵梯度不明显,还有如何提高间接竞争ELISA灵敏度等问题,其具体问题及解决方法总结如下:

新手ELISA请赐教

为什么我的ELISA结果如此奇怪?

ELISA阴性值偏高是什么原因?

ELISA方法建立中包被浓度的问题

ELISA中遇到的问题,请高手指点

间接竞争ELISA如何提高灵敏度

ELISA封闭液的配置

ELISA中碰到的问题

ELISA酶联免疫吸附,间接法测定抗体的问题

由于时间仓促,就先整理了这么多,希望各位战友都进来参与讨论,交流经验!

编辑: ludongcn 作者:口口草芳

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