PicoGreen荧光法定量生物制品中DNA残留
图1:标准曲线
图2:图1左下角低浓度部分的标准曲线放大
4. 样品分析
在每个样品中加入等体积的 2×PicoGreen工作溶液( 3.1节准备),充分混匀,避光于室温下孵育5分钟。将孵育好的溶液加入微量比色皿,使用ModulusTM单管型多功能检测仪检测其荧光值。将样品溶液的荧光强度代入回归方程,求出样品的残余DNA含量(ng/ml)。
5. 结果分析
在2010年《中国药典》(征求意见稿)中提出,PicoGreen定量DNA的方法检出限约0.3ng/ml,DNA含量在1.25-80ng/mL范围时线性较好。
在此次制备的标准曲线中,在0.625-80ng/ml保持了极好的线形(R2=0.9994),最低标准曲线点达到了0.3125ng/ml,并且有进一步稀释检测的可能。这表明ModulusTM单管型多功能检测仪可以完全满足药典规定的PicoGreen检测试验,并且可以进一步实现更高的灵敏度需求。
6. 关于ModulusTM单管型多功能检测仪
ModulusTM单管型多功能检测仪是Turner Biosystems公司生产的一款单管型多功能检测仪,它具有生物与化学发光检测、荧光检测和光吸收检测三个功能。ModulusTM单管型多功能检测仪采用模块化设计,可根据实验的需求,选用相应的检测模块,来完成生物与化学发光、荧光或光吸收检测。
编辑: muoquan