以4-MU（四甲基伞形酮）为底物定量检测ß-半乳糖苷酶(Gal)活性
6 标准曲线制备
游离4-MU能校准细胞培养物或组织中β-Gal活性。产生的标准曲线印证了在一定浓度范围内检测的线性。建议使用新仪器或首次检测时，至少操作本步骤一次。也可以隔几周做一次标准曲线作为定量检测、仪器检测的可靠性和技术一致性的的标准。
6.1 确保TBS-380安装了UV检测模块。如果使用微量适配器，要保证将其放入检测室里，从前面可以看到"UV"标记。
6.2 向10x10mm比色杯或微量比色杯中加入碳酸盐终止缓冲液制备空白对照。
6.3 向1.9mL碳酸盐终止缓冲液中加入100μL贮存液B（终浓度50nM）；当用微量比色杯时，向45 mL碳酸盐缓冲液中加入5.0mL贮存液B。
6.4 点击[STD VAL]键将标准值调到50，用控制面板上的箭头调高或调低数值。
6.5 点击[CAL]键校准，按[ENTER]键继续。按照指导插入空白和稀释液进行测量。按[ENTER]键接受校准值。
6.6 读取剩余的系列稀释样品 贮存液A的稀释溶液。
7 未知样品检测
7.1 用接近样品平均荧光值的稀释液来校准仪器，通常是100nM到500nM（见步骤5.3到5.5）。
7.2 将步骤4.2中的2mL溶液转移到10x10mm比色杯或100uL溶液转移到微量比色杯中，来测量未知样品。插入比色杯，按[READ]键。
7.3 记录结果或通过电子表格界面将数据输入到Excel表格中。
8 参考文献
Ziebold, T. O. (1967) Anal. Chem. 39, 858.
编辑: muoquan
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