可分泌到细胞外的荧光素酶-Gaussia荧光素酶
原理：
Gaussia luciferase是分离于夏威夷水域的一种大型海洋桡脚类动物的新型荧光素酶。通过报告基因载体，Gaussia luciferase可用于哺乳动物细胞表达。表达后的Gaussia luciferase为单条肽链的单体酶，其分子较小（185aa），且具有分泌性信号肽，因此可通过内质网分泌到细胞外。该荧光素梅催化底物腔肠素的氧化反应并且发光（480nm），该反应无需ATP参与。
与其他荧光素酶相比，使用Gaussia luciferase作为报告基因有更多的优势：
1．分泌型荧光素酶，可直接取上清检测，无须裂解细胞 ；
2．发光强度高，是其它荧光素酶的1千倍；
3．反应无须ATP，不受ATP影响；
4．稳定性高，对温度、PH值等耐受性强。
反应：
检测方法：
使用Targetingsystems的Gaussia Luciferase Assay System：
1.试剂准备：将试剂盒中的100×底物与Buffer混合，形成Gaussia检测液，使用前平衡到室温；
2.样品准备：直接取20ul细胞培养上清，或使用裂解液裂解细胞后取20ul细胞裂解液；
3.检测：20ul样品与50ulGaussia检测液混合，放入ModulusTM多功能检测仪（http://www.yph-bio.com/Equip.asp?c=luminometer）中检测发光值。
编辑: yishuitan 作者:丁香园通讯员
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