应用发光细菌检测环境毒性
原理：
发光细菌是一类在正常的生理条件下能够发射可见荧光的细菌。发光细菌在正常的生理条件下能发出波长在450～490nm 的蓝绿色可见光，在一定的试验条件下发光强度是恒定的。与外来受试物接触后，由于毒物具有抑制发光的作用，发光细菌的发光强度即有所改变，变化的程度与受试物的浓度在一定范围内呈相关关系，同时与该物质的毒性大小有关。利用发光细菌来检测有毒物质，由于有毒物质仅干扰发光细菌的发光系统，发光强度的变化可以用发光光度计测出，费时较少且灵敏度高，操作简便，结果准确，所以利用发光细菌的发光强度作为指标来监测有毒物质，在国内外越来越受到重视，在环境监测中的应用也越来越广泛。我国于1995年将这一方法列为环境毒性检测的标准方法(GB／T15441—1995)。
目前国内常用的3种发光细菌为：明亮发光杆菌、费氏弧菌、青海弧菌。其中明亮发光杆菌在“GB/T15441-1995 水质 急性毒性的测定 发光细菌法”中所使用；费氏弧菌在欧盟的标准中所使用；青海弧菌是在青海湖的鱼体内提取的菌种，属淡水菌，在测试饮用水时有较大优势。
反应机理：
发光机理的研究表明，不同种类的发光细菌的发光机理是相同的：是由特异性的荧光素酶、还原性的黄素(FMNH2)、八碳以上长链脂肪醛(RCHO)、氧分子(02)所参与的复杂反应：
检测方法
以明亮发光杆菌T3小变种检测为例：
1.试剂与材料准备
a)发光细菌冻干粉复苏：使用3%的氯化钠复苏发光细菌冻干粉，然后稀释到1万细胞/ml，形成工作液；
b)参比毒物氯化汞：制作不同浓度的氯化汞作为参比毒物0.02 - 0.24mg/L；
c)样品：采集或准备相应的待测样品，使用蒸馏水稀释，然后加入氯化钠（终浓度3%）。
2.仪器
ModulusTM单管型多功能检测仪(http://www.yph-bio.com/equip/modulus/modulus.asp)或ModulusTM微孔板型多功能检测仪(http://www.yph-bio.com/equip/modulus/Modulus_II.asp)
3.样品检测
a)取一定量的发光细菌工作液，放入发光检测仪中检测发光值；
b)加入待测样品，混匀，孵育15分钟；
c)孵育完成后，检测残留发光值。
编辑: yishuitan 作者:丁香园通讯员
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