应用发光方法检测ATP含量
3.试剂和标准制备
注：ATP污染会导致错误的结果和背景值的增高。务必在检测操作和试剂制备时戴手套防止ATP污染。
3.1 室温平衡样品缓冲液；
3.2 打开rL/L试剂前，轻弹试剂瓶确保冻干物都收集到瓶底；
3.3 将rL/L试剂缓冲液加到rL/L试剂瓶中；
3.4 连续并缓慢地颠倒试剂瓶几次，以便能充分溶解。不要振摇试剂瓶；
3.5 使用前，室温静止平衡rL/L试剂1小时(注：rL/L试剂能常温保存8个小时，分开使用可在-20°C长期保存) ；
3.6 用检测缓冲液10倍倍比稀释ATP标准样（1x10-7 M），直到稀释至1x10-11 M。
4.仪器安装
4.1 关闭ModulusTM单管型多功能检测仪电源开关，将发光模块安装到样品室中；
4.2 打开电源开关，使仪器预热1min；
4.3 设置10s的样品检测时间；
4.4 保存方案已备日后使用（可选）。
5. ATP标准曲线
5.1 将10 µL检测缓冲液加入有100 µL rL/L试剂的1.5ml离心管中；
5.2 立刻将1.5ml离心管放到ModulusTM单管型多功能检测仪中，盖上盖子；
5.3 点击"Measure Luminescence" 图标开始检测；
5.4 记录下检测数值，并可多次重复获得背景水平值，然后从结果中除去背景平均值；
5.5 根据步骤3.6中的稀释方式，将10 µL最低浓度（1x10-11 M）的ATP加入有100 µL rL/L试剂的1.5ml离心管中；
5.6 立刻将1.5ml离心管放到ModulusTM单管型多功能检测仪中，盖上盖子；
5.7 点击"Measure Luminescence" 图标开始检测；
5.8 记录下检测数值，并用以下浓度的ATP重复操作，连续5个浓度级别从1x10-11 到 1x10-7 M ATP。
6. 样品分析
6.1 将10 µL检测缓冲液中的制备样品加入有100 µL rL/L试剂并做好标记的1.5ml离心管中；
6.2 点击"Measure Luminescence" 图标开始检测；
6.3 记录下检测数据，并将剩余样品安步骤6.1-6.2操作；
6.4 根据标准曲线的绘制方式制取检测样品的相对光强度的曲线图，以此获得检测样品的ATP浓度。
7. 关于ModulusTM单管型多功能检测仪
ModulusTM单管型多功能检测仪（http://www.yph-bio.com/equip/modulus/modulus.asp）是Turner Biosystems公司生产的一款单管型多功能检测仪，它具有生物与化学发光检测、荧光检测和光吸收检测三个功能。ModulusTM单管型多功能检测仪采用模块化设计, 可根据实验的需求, 选用相应的检测模块, 来完成生物与化学发光、荧光或光吸收检测.
编辑: yishuitan 作者:丁香园通讯员
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