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单胺氧化酶(MAO)发光检测

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发布日期:2010-06-23 14:57 文章来源:北京原平皓生物技术有限公司
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关键词: 单胺氧化酶 MAO Luciferase 发光检测   点击次数:

原理:

单胺氧化酶(MAO)是一种膜结合线粒体酶,在多巴胺氧化代谢中起重要作用。根据其对底物或抑制剂结合的特异性、细胞分布、免疫特异性等特性分为A和B两种形式。它与人体的很多精神性疾病以及健康有着密切的关系,譬如帕金森症、阿尔之海默症、精神分裂症和攻击性行为及癌症等。因此,MAO作为新药物的靶标越来越受到广泛的关注和研究。

将MAO的酶促反应与荧光素酶的发光检测相偶联,即可通过发光检测来确定MAO的活性,从而筛选出可影响MAO活性的药物或化合物。

反应:


 

实验方法(详见附录):

1、试剂准备

a) 按照说明书,制备4×MAO底物溶液

b) 按照说明书,制备2×MAO酶溶液

c) 按照说明书,制备荧光素酶检测溶液

2、样品准备

a) 制备4×待检测样品

3、检测发光

a) 每孔中加入12.5ul的4×MAO底物溶液

b) 再加入12.5ul的4×待测样品

c) 再加入25ul的2×MAO酶溶液

d) 室温下孵育1h

e) 每孔加入50ul荧光素酶检测溶液,混匀

f) 室温下孵育20min后,使用Modulus发光检测仪检测发光
 

编辑: helen 作者:李鹏飞

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