细胞色素P450（CYP450）发光检测
原理：
细胞色素P450（cytochromeP450，简称CYP450）为一类亚铁血红素—硫醇盐蛋白的超家族，它参与内源性物质和包括药物、环境化合物在内的外源性物质的代谢。该酶系是重要的药物非靶点的功能蛋白质，参与药物代谢的最重要的I相酶，催化了90％以上的药物、毒素以及致癌剂等在人体内的代谢转化和清除。
将P450的酶促反应与荧光素酶发光反应相偶联，可以通过检测发光的方式来检测P450的活性。
反应：
检测方法：
1、试剂准备
a) 按照说明书，配制4×CYP反应液
b) 按照说明书，配制2×NADPH
c) 按照说明书，配制荧光素酶检测液
2、样品准备
a) 每孔12.5ul的待测样品，体积不够时，使用纯水稀释到12.5ul
3、发光检测
a) 每孔中加入12.5ul的待测样品
b) 然后加入12.5ul的4×CYP反应液，在37℃下孵育10min
c) 然后加入25ul的2×NADPH启动CYP反应
d) 室温下继续孵育10-40min
e) 最后加入50ul荧光素酶检测液，使用Modulus发光检测仪检测发光
编辑: helen 作者:李鹏飞
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