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1. 灵敏度/检测限（detection limit）
“灵敏度”最初是一个统计学概念，表示样本中检测结果阳性数占所有阳性样品的比例。扩展到各个领域当中就成为各种机器或方法的性能指标，灵敏度越高，越能反应测定值的实际情况。在Western Blot试验中，如果要量化抗体检测的灵敏度就需要一个参数——抗体检测限（detection limit）。
2.抗体浓度
抗体浓度对于商品化抗体的影响有两方面。首先，较高浓度的抗体（>0.5mg/mL）通常性质更稳定，受生产工艺和成本控制等因素影响，不同品牌的抗体的浓度也不相同，所以购买时应注意比较；另外，经验不足的实验者往往被抗体的体积迷惑，然而相同质量下，低浓度的抗体体积更大所以，计算抗体性价比的时候应该考虑的因素是抗体的质量而非体积。
"古老"而实用的技术-庆WB命名30年
编者按：对仅有50多年历史的分子生物学来说，30岁的“Western Blot”可谓“古老”。尽管它存在这样那样的问题，但仍然广泛应用于多种基因功能、转基因检测等实验中。它也是论坛中讨论最为活跃的技术之一。
命名为“Western Blot”，与“Northern Blot”一样，完全源于科学家的幽默。在一次鸡尾酒会上，某人（现在已无人考证）开了这样一个玩笑，所有人都笑了，这个命名就这样延续了下来。
1975年，Edwin Southern 发明了DNA杂交技术。这一技术被命名为“Southern Blot”，以表彰Edwin Southern的杰出贡献。
1977年，George Stark及其同事发明了检测RNA的方式。这一技术被命名为“Northern Blot”。
1979年，George Stark发展进早期的蛋白印迹技术，将蛋白来电泳凝胶上转移到活化的纤维素上。随后，Harry Towbin发展出更快速、简单的电转技术。
1981年，W. Neal Burnette正式将这一技术命名为“Western Blot”。
对仅有50多年历史的分子生物学来说，30岁的“Western Blot”可谓“古老”。
2008年，Max Planck 生物化学研究所的Mathias Mann发表题为“Can Proteomics Retire the Western Blot?”论文（J. Proteome Research.2008 7（8）:3065）认为，质谱技术可以一次分析样品中的多种蛋白，如今的蛋白质组研究更多地依赖于质谱技术；Western Blot面临被淘汰的危险。毕竟，Western Blot的检测范围大约为3-4 logs，而血液中大部分的有生物意义的蛋白浓度约为12 logs。
然而，随着电泳及转膜技术的改进、商业化抗体的不断增加，Western Blot操作日益简单，分析方法及工具更加多样。成像技术的切口革新、低检测限（高灵敏度）抗体的出现，Western Blot的检测范围得到扩展，定量/半定量成为可能。Western Blot因为其设备便宜、技术成熟，仍将在较长时间内应用于多种基因功能、转基因检测等实验中。同时，Western Blot已经应用到HIV、牛绵状脑病（疯牛病）、Lyme disease、乙肝等多种疾病检测中。
编辑: helen
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