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1. 灵敏度/检测限(detection limit)
“灵敏度”最初是一个统计学概念,表示样本中检测结果阳性数占所有阳性样品的比例。扩展到各个领域当中就成为各种机器或方法的性能指标,灵敏度越高,越能反应测定值的实际情况。在Western Blot试验中,如果要量化抗体检测的灵敏度就需要一个参数——抗体检测限(detection limit)。
2.抗体浓度
抗体浓度对于商品化抗体的影响有两方面。首先,较高浓度的抗体(>0.5mg/mL)通常性质更稳定,受生产工艺和成本控制等因素影响,不同品牌的抗体的浓度也不相同,所以购买时应注意比较;另外,经验不足的实验者往往被抗体的体积迷惑,然而相同质量下,低浓度的抗体体积更大所以,计算抗体性价比的时候应该考虑的因素是抗体的质量而非体积。

"古老"而实用的技术-庆WB命名30年

编者按:对仅有50多年历史的分子生物学来说,30岁的“Western Blot”可谓“古老”。尽管它存在这样那样的问题,但仍然广泛应用于多种基因功能、转基因检测等实验中。它也是论坛中讨论最为活跃的技术之一。

命名为“Western Blot”,与“Northern Blot”一样,完全源于科学家的幽默。在一次鸡尾酒会上,某人(现在已无人考证)开了这样一个玩笑,所有人都笑了···

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Western Blot为什么必须要用内参?

由于经费限制或者偷懒的原因,国内的不少人做Western Blot往往省略参照,导致结果出现问题时无法分析结果――即便有结果也可能影响结果的分析。