CRISPR/Cas9,RNAi等基因改造技术是最新发展起来的一种强有力的用于基因组编辑的分子生物学工具,现已广泛应用于各类动植物个体或细胞基因组的遗传学改造。为让广大从事医学、生命科学事业的人员更多的了解基因编辑实验技术方法,更高质量地完成科研任务,将于2016年5月14日至15日在北京举办实验技术培训班。每位学员均在教师的指导下,独立完成一系列全部实验,实验两人一组,人人操作,实验交替进行。
举办时间地点和单位:
2016年5月14日至15日(13日报到)
北京理工大学国际教育交流中心(海淀区北三环西路66号)
北京礼来科技发展中心
参加对象:
从事医学、生命科学、农学等领域科研工作者和高校教师及研究生。
授课方式:
理论讲授和实际操作紧密结合。每位学员在辅导教师的指导下,独立完成实验操作。
收费标准:
注册费: 2800元/人,2016年5月1日前报名并付款可优惠至:2600元/人。包括学费、资料费、试剂耗材费、其他材料费;免费提供工作午餐,可协助安排住宿,住宿费用自理。
推荐住宿地点:
北京理工大学国际教育交流中心360元/标间,速八酒店苏州桥店254元/标间。
报名方式:
名额有限,计划或确定参加烦请尽早提交报名回执表,以便安排;现场可领取纸质版盖章邀请函。
联系方式:
王老师 18910809780 邮 箱:swyxpx@163.com
课程安排:
5月13日
9:30~20:00 培训报到
5月14日
9:00~11:30
理论讲解:
基因表达调控相关技术:
1. 基因过表达技术(Over expression)
2. CRISPR/Cas9靶向基因改造技术( Knockout,Konckin,Deletion)
3. shRNA,siRNA基因调控技术(Knockdown)
实验操作:
1. 基因表达载体,shRNA、siRNA,CRISPR/Cas9构建
2.DNA连接,转化
13:00~17:00
理论讲解:
基因转染技术(不同的转染方法介绍,瞬时转染、稳定转染细胞系构建)
实验操作:
细胞转染(质粒转染,siRNA转染)
5月15日
9:00~11:30
理论讲解:
基因表达调控相关检测技术(荧光报告基因系统)
实验操作:
1. 细胞(组织)总RNA提取
2. RNA反转录(cDNA合成)
3.PCR鉴定基因表达
13:00~17:00
理论讲解:
Western Blot检测基因表达(制备过表达,Knockdown,Knockout等)
1. 细胞总蛋白提取,不同细胞组分提取(线粒体蛋白,细胞浆蛋白,细胞核蛋白,细胞膜蛋白)
2. SDS-PAGE制备(单一浓度:10%分离胶,梯度胶制备:4%-18%分离胶)
3. Western Blott技术
4. 抗体技术
实验操作:
1. 细胞总蛋白提取
2. SDS-PAGE蛋白胶制备及蛋白质电泳
3.转膜,及抗体孵育,检测