CRISPR/Cas9 基因靶向修饰技术 在线培训+云实验

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CRISPR 是继 RNA 干扰技术、高通量测序技术等之后生物科学发展历史上最具颠覆性技术之一，使用高效、迅速且简单，在生物医学研究领域及临床实践中引起一场巨变。经过近几年的发展，CRISPR 不仅成为了生物医学研究实验室的常规研究技术，也已经成功用于临床治疗和诊断，例如近期发表的启动于 2016 年的全世界第一个 CRISPR 基因编辑 T 细胞治疗肿瘤的临床实验证明安全可靠；此外，基于 CRISPR 的快速诊断技术在最近爆发的冠状病毒流感快速检测中大放异彩。CRISPR 技术正被越来越多的研究人员用来改造人类基因以消除疾病，创造生命力更加顽强的植物，消灭病原体等。在过去的 7 年中 CRISPR 技术斩获了生命科学领域各种重量级奖项，包括生命科学突破奖，盖尔德纳国际奖等，《Science》年度突破、《Nature》年度人物均授予了 CRISPR 单碱基基因编辑技术的突破，2019 年 9 月，北京大学邓宏魁组完成世界首例基因编辑治疗艾滋病和白血病，使 CRISPR 技术再一次成为生命科学的焦点。

CRISPR 技术不仅能够在不同物种中对特定的基因进行敲除，敲入等，经过改造后还能在转录水平调控基因的表达或者沉默、对特定的基因进行原位标记、在细胞水平或体内对单碱基进行编辑（BE2，BE3，ABE 等）、体外系统中用于病原微生物或者基因突变的检测等（Sherlock、DETECTR）；此外，通过与慢病毒或 AAV 技术联合可以轻松在全基因组水平进行基因快速筛选，David Liu 研究小组与 2019 年实现了无模板的基因敲入技术。随着研究的深入，CRISPR/Cas9 系统的应用更加便捷、高效，也更广泛，目前该技术成功应用于人类细胞、斑马鱼、小鼠以及细菌等基因组精确修饰，成为科研人员的强大工具，基于 CRISPR 临床实验已经取得初步成功。

为了让更多的科研人员及时全面的掌握 CRISPR 最新技术，并应用的相应的领域研究中，结合近期新冠肺炎疫情影响，减少旅行或者接触带来的不必要风险，微旋基因将于 2020 年 7 月 18 日举办 CRISPR/Cas9 基因编辑在线培训+云实验学习班。其中理论部分采用在线授课模式，在两天的时间内带领大家详细了解基因编辑的发展历史，技术原理，应用案例（基因敲除、敲入、单碱基基因编辑、转录激活/沉默、全基因组筛选、基因检测、基因标记、无模板基因敲入等），并在线针对基因编辑不同应用方向进行实战演练。云实验为可选部分在理论课程结束后采用同步直播方式进行，确定参加云直播后会提前快递寄送所需要的实验材料，实验仪器自备，课程当天同步进行实验。

课程福利
所有参加培训的老师均可获得：
1. 免费基因编辑质粒载体一份：可以用于哺乳动物、植物、真菌、细菌、斑马鱼、线虫等，共 62 种）。
2. 免费赠送 sgRNA 离线设计软件（有基因组 DNA 序列即可设计！）。
3. 分子生物学免费软件安装包一套（snapgene，premier6，Graphpad6.01，亿图图示专家-技术路线图绘制，Endnote，Flowjo 等）。
4. 免费获得信号通路图制作神器- Biomedical-PPT-Toolkit-Suite。

课程安排
日期                时间                    培训内容
7 月 18 日         9:00-11:30          理论讲解：
一、基因编辑技术简介（三代基因编辑工具）
1. ZFN 2.TALEN 3.CRISPR
二、CRISPR/Cas9 基因编辑技术原理
1. CRISPR/Cas9 发现历史
2. CRISPR/Cas9 作用机制解析
3. CRISPR/Cas9 系统改造策略
13:00-17:00          理论讲解：
一、sgRNA 在线设计构建实战演练
1. 靶基因序列查找
2.sgRNA 在线设计合成
二、CRISPR/Cas9 转染策略:
1. 生物转染（慢病毒、腺相关病毒等）
2. 物理转染（电转核酸/RNP、显微注射、基因枪）
3. 化学转染（脂质体、阳离子聚合物）
三、CRISPR/Cas9/sgRNA 效率检测，脱靶检测及解决策略
1、高保真 Cas9（espCas9、Hifi-Cas9、Cluster1-Cas9）
7 月 19 日         9:00-11:30           理论讲解：
一、CRISPR 技术应用解析
1. 基因敲除
2. 基因敲入实战演练
3.CRISPR 在转录调控中的应用
4.CRISPR 靶基因标记定位
二、CRISPR 案例解析
1. 基因敲除在小鼠模型构建、植物、细胞、细菌、真菌等中                                                      的应用案例解析
2. 基于 CRISPR 的全基因组基因敲除高通量筛选策略
3. 基于 CRISPR 的全基因组转录激活/抑制高通量筛选策略
三、CRISPR/Cas9 与基因沉默技术（siRNA、shRNA）系统比较
13:00-17:00          理论讲解：
一、单碱基基因编辑技术简介及在基因治疗中的应用
1.HF2-BE2
2.BE3 系统
3.ABE 系统
4. 单碱基基因编辑脱靶克服。
二、基因 CRISPR 的基因检测系统
1、CRISPR-Cas12a 系统介绍 (DETECTR)
2、CRISPR-Cas13a 系统介绍 (SHERLOCK-多重病原菌检测)
三、CRISPR/Cas9 系统在肿瘤和遗传病治疗中应用解析
1、CRISPR 结合免疫检查点抑制剂治疗肿瘤
2、单基因遗传病治疗（DMD、先天性黑朦、地中海贫血等）
3、CRISPR 治疗 HIV-基因编辑婴儿解析
4、CRISPR 治疗 HIV 炎性白血病病例解析
四、新一代无模板基因敲入系统解析
1、CRISPR Primer-editing 基因敲入原理及应用
实验直播时间将根据参加实验的同学时间安排，在课上另行约定
实验内容                                  培训内容
gRNA 敲除载体构建               1. 靶基因序列查找
2.sgRNA 在线设计合成
3. 敲除载体选择及线性化
4. sgRNA 连接，转化等
敲除载体转染及初步鉴定        1. 敲除质粒转染
2. 转染筛选及敲除效果鉴定
3. 单克隆鉴定
举办地点
线上腾讯会议
参加对象
从事医学、生命科学、农学等领域科研工作者和高校教师及研究生。
收费标准
注册费：理论授课 3500 元/人，2020 年 07 月 08 号之前汇款报名可以优惠至：3300 元/人。实验操作课程需加 800 元/人，同一个单位三个人以上报名可以免费构建价值 1500 元的质粒一个。
银行汇款
账户名：北京微旋基因技术有限公司
开户行：中国建设银行北京宣武支行
账  号：11001019500053058529
备  注：银行转账的学员，请于汇款单备注栏内注明参会人姓名
联系人
许老师   18500298321   010-53516075       sales@micro-helix.com
承办单位：                               
北京微旋基因技术有限公司

编辑： 会议君