CRISPR是生物科学领域的颠覆性技术,使用高效、迅速且简单,在生物医学研究领域引起一场巨变,并因此席卷全球实验室。研究人员利用它调整人类基因以消除疾病,创造生命力更加顽强的植物,并且消灭病原体。《Science》2017年度突破、《Nature》2017年度人物均授予了CRISPR相关技术的突破,CRISPR技术再一次成为生命科学的焦点。
随着近几年的发展,研究者开发出越来越多基于CRISPR的新型基因编辑技术,例如CRISPRa/i,基因定位,表观遗传修饰,单碱基基因编辑系统(BE2,BE3,ABE等),CRISPR/C2c2基因突变检测系统等。CRISPR/Cas9系统的应用更加便捷、高效,也更广泛,目前该技术成功应用于人类细胞、斑马鱼、小鼠以及细菌的基因组精确修饰,成为科研人员的强大工具。为了让更多的科研人员及时全面的掌握CRISPR最新技术,获得基因编辑质粒系统。特于2019年8月10日至11日在北京理工大学国际教育交流中心(海淀区北三环西路66号)举办CRISPR/Cas9基因靶向修饰技术培训班。在带教教师的指导下,学员独立完成一系列全部实验,免费获得一份CRISPR/Cas9敲除质粒载体(可以用于哺乳动物、植物、真菌、细菌、斑马鱼、线虫等,共55种,见尾页)。
课程安排:
8月9日 10:00-18:00
培训报到
8月10日 9:00-11:30
理论讲解:
一、基因编辑技术简介
1.ZFN 2.TALEN 3.CRISPR
二、CRISPR/Cas9基因编辑技术
1.guide RNA序列设计
2.靶基因序列查找
3.sgRNA在线设计、特异性分析和效率验证
4.不同物种sgRNA设计
实验操作:
一、CRISPR/Cas9基因表达载体克隆构建
1.sgRNA设计合成
2.敲除载体选择及线性化
3.sgRNA连接,转化等
13:00-17:00
理论讲解:
一、CRISPR/Cas9转染策略
1.生物转染
2.物理转染
3.化学转染
4.筛选策略选择
二、脂质体转染,电转,病毒转导,显微注射等)
三、Crispr/Cas9转染策略(植物,动物,原核生物)
四、CRISPR/Cas9病毒系统选择
实验操作:CRISPR/Cas9敲除质粒转染靶细胞
8月11日 9:00-11:30
理论讲解:
一、CRISPR技术应用解析
1.基因敲除
2.基因敲入
3.CRISPR在转录调控中的应用
4.CRISPR靶基因标记定位
5.基因敲除小鼠模型构建策略
二、CRISPR案例解析
1.基因敲除小鼠模型构建
2.植物基因敲除应用
3.细菌,真菌等基因敲除应用
三、Cripr基因脱靶分析及解决方案
四、Crispr/Cas9与siRNA、shRNA
实验操作:
1.CRISPR/Cas9转染后靶DNA检测
2.靶基因修饰位点扩增及鉴定
13:00-17:00
理论讲解:
一、单碱基基因编辑技术
1.HF2-BE2 2.BE3系统 3.ABE系统。
二、CRISPR-Cpf1系统介绍
三、CRISPR-C2c2系统介绍
四、多靶点sgRNA载体构建策略
五、Crispr/Cas9系统在肿瘤和遗传病治疗中应用解析
实验操作:
1. CRISPR基因敲除效果检测
承办单位:
北京微旋基因技术有限公司
举办时间:2019年8月10日至11日
举办地点: 北京理工大学国际教育交流中心(海淀区北三环西路66号)
参加对象从事医学、生命科学、农学等领域科研工作者和高校教师及研究生。
授课方式理论讲授和实际操作紧密结合。每位学员在辅导教师的指导下,独立完成实验操作。
收费标准注册费: 2800元/人,2019年8月1号之前汇款+报名可以优惠至:2600元/人。包括学费、资料费、试剂耗材费、其他材料费;免费提供工作午餐,可协助安排住宿,住宿费用自理。
推荐住宿地点:
如家快捷酒店(北京苏州桥人民大学店) 433元/大床,467/标间。
速八酒店苏州桥店342元/大床、376元/标间。
北京理工大学国际教育交流中心360元/标间。
联系人王老师 18910809780(微信同号)
E-mail: cas901@126.com
参加学习的学员,请来电或者微信联系索取word版函件及报名回执表。