超净台里的酒精灯 有害无益？（图）

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发布日期：2012-02-20 15:04 文章来源：丁香通
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关键词： 丁香园 生物专题 义翘神州 细胞培养 超净台 　 点击次数：

我所在的实验室有用于培养细胞的超净台，内置酒精灯一个。老师传授授说在打开培养瓶或培养液之前要用酒精灯的火焰快速的烧一下，目的是消毒，减少污染。自己很怀疑这样做的有效程度，因为瞬间的火焰不可能将瓶口的温度升高很多，又如何达到消毒的目的呢？在网上搜索后找到一些资料，认为不应在超净台内使用火焰。现将其放到丁香园上供大家参考，希望有经验的同学给个说法，超净台内到底应不应该有酒精灯。

Open flames are not required in the near microbe-free environment of a biological safety cabinet. On an open bench, flaming the neck of a culture vessel will create an upward air current which prevents microorganisms from falling into the tube or flask. An open flame in a BSC, however, creates turbulence which disrupts the pattern of HEPA-filtered air supplied to the work surface. When deemed absolutely necessary, touch-plate microburners equipped with a pilot light to provide a flame on demand may be used. Internal cabinet air disturbance and heat buildup will be minimized. The burner must be turned off when work is completed. Small electric "furnaces" are available for decontaminating bacteriological loops and needles and are preferable to an open flame inside the BSC. Disposable sterile loops can also be used.摘自：http://www.cdc.gov/biosafety/

事实上使用酒精灯会造成空气对流，从而带起超净台面上的灰尘，反而增加污染的机会。更何况还增加了火灾的隐患。 摘自：http://cell.dxy.cn/bbs/topic/5849340

The flaming of lips of tubes and flasks must ALWAYS be done whenever culture liquid is to be poured from a container (e.g., pouring plates). Flaming should be routinely done when caps are removed from tubes during transfer of cultures. The purpose of flaming is not to sterilize, but to warm the tube and create warm air convection currents up and away from the opening. This "umbrella" of warm, rising air will help to prevent the entrance of dust particles upon which contaminating bacteria reside.摘自：http://structbio.vanderbilt.edu/chazin/wisdom/labpro/sterile.html

受到加分的鼓励，把CDC这段生物安全柜的文章翻译了。错误之处，万望指正，谢谢。译文如下：在生物安全柜几乎没有微生物的环境中，明火是不需要的。在开放的操作台上（BSC之外)，通过灼烧培养瓶口，可以创造一个向上的气流，预防携带微生物的尘埃坠落入试管或培养瓶。而在一个生物安全柜中，明火产生扰动气流，破坏了供向操作台面的洁净空气的流向。如果真的确实需要明火，可以使用装备控制火焰大小的微型灯具。这样，柜内空气扰动和加热效应会减少到最低。需要火焰的操作结束后，必须关闭灯具。另外，相对于在生物安全柜内使用明火，更好的选择是使用电气化的“熔炉”来消毒接种环和接种针。一次性的无菌环也是一个选择。

1、快速过火是不可能杀灭细菌的，过火的目的是为了固定住细菌防止扩散，火焰的温度能够使气流形成负压，在酒精灯周围10cm处形成一个无菌区，操作在此范围内进行为好。

2、一些器械，包括镊子，剪刀，接种环，滴管尖端都可以采取火焰灼烤的灭菌方法。但是要烧烤足够长的时间，并且接触组织时要充分冷却。

3、在正常情况下，快速操作比在酒精灯附近磨蹭无菌效率更高。

我认为超净工作台内应该放酒精灯。首先，超净台内的净化空气是从上面往下吹，它的热量可以形成对流，可以在局部形成无菌区预防微生物感染。其次，酒精灯的消毒作用也是不能忽视的：做实验时将培养瓶内的培养液或其它液体倒掉时，瓶口难免会有一些细胞，可以在酒精灯外焰上过几下，产生的高温可以消灭细胞，避免细胞交叉污染；装培养液和各种液体的瓶子口受污染的几率也是很大的，在火焰上消一下毒也能预防污染啊；超净台内的用过的吸管进行消毒也是必要的，因为紫外线不能100%的消灭微生物。再一个，我们老师在加拿大读博士后一直都是这样做的，应该没问题吧！这只是我的个人想法，不一定对！也请高手发表一下意见，大家讨论一下吗！

请问如何“固定住细菌”呢？在不固定的情况下，细菌是如何扩散的呢？

一般来说这种固定可能通过这样两种途径：

1、气流封闭，火焰产生热负压，使外界气流无法进入冷的容器内。

2、火焰的瞬时高温能使灰尘（上面附着细菌）粘附在瓶口处，而不会进入容器内，这有点类似作细菌染色时的烤片。一般瓶口处很容易积留灰尘，在打开盖子的瞬间会导致灰尘飞出。

超净台内的洁净气流是单向流动的，以此来保护操作对象不被超净台外面的空气污染。而酒精灯产生的火焰却干扰了正常的气流，有可能使含有灰尘颗粒的空气掺入超净台内。

我们试验室采用美国势管理，在美国CELL CULTURE是看不到酒精灯的，我们实验室也禁止使用，被发现使用是永远不许进来做试验的。他们这样管理是有他们道理的，实验室到现在为止没有一例细胞培养有污染的。各位也谈论了很多酒精灯的利弊，但归根揭底弊是要远远大于利的，所以应该禁止酒精灯的使用！我相信随着我们国家的实验室条件的增强，酒精灯会绝迹的。转而更强调无菌操作，这才是细胞培养的根本。

编辑: cq

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