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真核重组让研究更有价值
● 真核细胞本身的蛋白,尽量用真核表达,真核的表达环境使蛋白更有可能形成正确的结构,具备糖基化等修饰,更可能具有天然功能。而目前生命科学研究中,研究的模式生物大都为真核生物。
● 在真核细胞表达真核细胞的蛋白,折叠、修饰等方面更接近于天然蛋白,一般内毒素更低。这样试验过程才更接近真实的细胞活动。
● 如果你的运气足够好,发现你的实验结果可以为药物开发提供线索。恭喜你!如果你的实验是用真核表达的重组蛋白完成的,药企肯定会更感兴趣,因为这样的药物候选分子商业化风险更小。
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无血清培养基
2.各类小鼠胚胎癌细胞系培养基
DMEM/F12 1:1混合成1000ml
NaHCO3 2.4g
HEPES(1.5M) 10.0ul
硒酸(5*10-6M) 10.0ug
纤粘连蛋白 1ug/cm2(37度作用15-30分钟)
胰岛素 1000.0ug
转铁蛋白 5000.0ug
3.NIH3T3小鼠成纤维细胞培养基
DMEM/F12 1:1混合成1000ml
HEPES 15mM
大豆胰酶抑制剂 0.1%
胰岛素 10.0ug/ml
转铁蛋白 25.0ug/ml
纤粘连蛋白 5.0ug/ml
4.杂交瘤细胞培养基
DMEM/F12 1:1混合成1000ml
NaHCO3 1.2g/L
HEPES 15mM
胰岛素 5.0ug/ml
氨基乙醇 20.0uM
硒酸 2.5mM
转铁蛋白 35.5ug/ml
编辑: cq