N端测序
原理：
蛋白质的α氨基与（PITC）在弱碱性条件下形成（PTC-）衍生物，后者在五水TFA下裂解，释放出N端（ATZ-）氨基酸，然后转化成（PTH-）氨基酸,这些衍生物用HPLC法加以鉴定。
Edman 降解示意图
仪器：
ABI 491A 蛋白测序仪
岛津 PPSQ-33A 蛋白测序仪
样品要求：
1、样品状态：可以是干粉，溶液或固定在PVDF膜上（转膜的蛋白质分子量<40kD,建议丽春红染色），注意不要使用NC膜（硝酸纤维素膜）替代。
2、样品浓度及纯度：N端测 总量>50pmol；纯度>90％；浓度>1mg/ml
3、含盐量：挥发性无机盐<20mM；不挥发性无机盐<5mM； 请务必标明样品缓冲液的成分，建议不使用Tris缓冲体系
4、请务必告知样品表观分子量范围
实例分析
某样品N端测序分析
理论N端序列：NH2NSXXECPXSH
图谱解析：根据以上图谱得到的样品的N端末端序列为：NH2NSXXECPXSH
其中X代表某一氨基酸（保密）
常见影响测试的情况：
1、样品纯度不足
2、含盐过多导致无结果，甚至损坏仪器
3、样品量太少导致无结果
4、若蛋白质出现糖基化或N端被封闭，不能用此方法进行测试；
编辑: helen
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