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1、义翘神州可规模化供应重组蛋白
生物医学研究需要大量重组蛋白。小量重组蛋白供应无法满足科学研究需要。义翘神州为世界范围内为数不多的可规模化供应重组蛋白生物技术企业。
2、兔单抗生产≠兔杂交瘤技术
教科书上的杂交瘤技术已经不是单克隆抗体生产的唯一方法。利用分子生物学技术克隆高灵敏度抗体基因，转至真核细胞大规模表达抗体，是当今生物技术工业的重要技术。这种技术更稳定、更高产。

义翘神州的兔单抗就是这样开发、生产的。

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应用流式细胞仪分析细胞周期实验步骤

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发布日期：2012-09-25 16:07 文章来源：丁香园
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关键词： 细胞 细胞培养 技术专题 义翘神州 丁香园 丁香通 　 点击次数：


DNA Flow Cytometry (Cell Cycle Analysis)

Stock Solution

Trisodium citrate dehydrate Na3C6H5O7.2H2O 柠檬酸三钠    500 mg

Nonidet P40 (NP40)             0.5 ml

Spermine tetrahydrochloride 四氢氯化精胺      261 mg

Tris (hydroxymethyl)-aminomethane (Tris base)     30 mg

2d-H2O                  Total   500 ml

Titrate pH to 7.6, Store at 4℃

Citrate Buffer

Sucrose 蔗糖          42.75 g (250 mM)

Trisodium citrate dehydrate Na3C6H5O7.2H2O     2.88 g (40 mM)

DMSO             25 ml

2d-H2O                 Total   500 ml

Titrate pH to 7.6, Store at 4℃

Solution A:

Trypsin    胰蛋白酶 0.6 mg

Stock soln     100 ml

Titrate pH to 7.6, Store at 4℃

Solution B:

Trypsin inhibitor    胰蛋白酶抑制剂 50 mg

RNase A       10 mg

Stock soln       100 ml

Titrate pH to 7.6, Store at 4℃

Solution C:

Propidium iodide        50 mg

Spermine tetrahydrochloride  116 mg

Stock soln          100 ml

Titrate pH to 7.6, Store at 4℃. Avoid from light exposure

Procedures of DNA Flow Cytometry (Cell Cycle Analysis)

-  Cell pellet (2-5X105 cells/sample)

-  Resuspend and fix cells in cold citrate buffer for 5-10 min at 4℃to make the cell density 2X105 cells/200 ml citrate buffer. (May keep cells at 4℃for up to 3-5 days)

-  Prewarm solutions A and B at room temperature.

-  Transfer cells to a Falcon tube (Becton Dickinson FCM tube, #2052 or #2054).

-  Add 450 ml Soln A for 10 min at room temp. vigorous vortexing.

-  Add 375 ml Soln B for 10 min at room temp. vigorous vortexing.

-  Add 100 ml cold Soln C to stain the nuclei. Brief vortexing.

-  Run FAScan

The method is according to Vindelov, et al. (Cytometry 1983; 3:323-7) with some modifications.
 

编辑: gaowei2010

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