丁香园 | 丁香通 | 人才 | 会议 | 药学 | 博客  
 点击次数:

你知道吗? 详细 >>

1、义翘神州可规模化供应重组蛋白
生物医学研究需要大量重组蛋白。小量重组蛋白供应无法满足科学研究需要。义翘神州为世界范围内为数不多的可规模化供应重组蛋白生物技术企业。
2、兔单抗生产≠兔杂交瘤技术
教科书上的杂交瘤技术已经不是单克隆抗体生产的唯一方法。利用分子生物学技术克隆高灵敏度抗体基因,转至真核细胞大规模表达抗体,是当今生物技术工业的重要技术。这种技术更稳定、更高产。

义翘神州的兔单抗就是这样开发、生产的。

流式测凋亡PBS漂洗的目的

转载请注明来自丁香园
发布日期:2012-09-25 16:08 文章来源:丁香园
分享到: 收藏夹 新浪微博 腾讯微博 开心网 豆瓣社区 人人网
关键词: 细胞 细胞培养 技术专题 义翘神州 丁香园 丁香通   点击次数:


问:在用annexin v/pi双染流式测凋亡,测出来正常对照细胞凋亡率就很高。因为是贴壁细胞要消化,试剂盒还要求4度PBS漂洗两遍,再悬在binding buffer里染色,这样反复吹打,离心对细胞损伤很大。我想知道PBS漂洗的目的是什么,能少漂一次或者不漂洗吗?要减少正常对照凋亡率还有什么需要注意的?

答:

1、PBS漂洗的目的:就是去掉胰酶和细胞碎片,如果你的细胞悬液碎片不多,可以洗一次,另外,吹打细胞时,先在吸管或枪头多吸一些液体,吹时少吹一些,避免产生气泡和气液产生的切力损伤细胞。

2、4度PBS:就是为了避免细胞活化,细胞凋亡的过程也是一种活化,是一种连锁的促进过程。

3、右上象限细胞一般为急性坏死细胞 ,参比正常对照,如果数量相似,不应算在凋亡,晚期凋亡细胞应在以前向角、侧向角为轴的左下象限。急性坏死细胞应在右上象限。通过划分,可以分开的。而死亡细胞着色后,其荧光量没有凋亡细胞高。
 

编辑: gaowei2010

以下网友留言只代表网友个人观点,不代表网站观点