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蛋白芯片样品准备及运输注意事项

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发布日期:2012-05-30 11:03 文章来源:丁香园
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关键词: 生物专题 蛋白 丁香园 丁香通 欧易 oebiotech   点击次数:



    细胞
    约1×107个贴壁细胞去培养基后,常温PBS洗涤3次,直接加入裂解缓冲液,推荐使用Full Moon的Protein Extraction Buffer 或者RIPA Lysis Buffer,根据培养皿大小加入适量缓冲液,反复吹打,待细胞裂解后,收集溶液,4℃离心后收集上清,置-70℃冰箱保存,干冰运输。

    悬浮培养细胞直接收集,收集约1×107个细胞,常温PBS洗涤3次,低速离心沉淀细胞,弃去PBS(尽量去除干净),直接加入裂解缓冲液,推荐使用Full Moon的Protein Extraction Buffer 或者RIPA Lysis Buffer,根据细胞数量加入适量缓冲液,按操作流程裂解后,4℃离心后收集上清,置-70℃冰箱保存,干冰运输。

    组织
    采集新鲜组织(注意:生物体血液限流后20分钟内取材料并保存好),组织块以PBS或生理盐水清洗干净(尽量洗净血液),切为小块,放入液氮速冻后-70℃保存,干冰运输,或福尔马林/TriZol中4℃保存,一周内,常温运输。

    血清和血浆
    采集新鲜血液,切忌溶血。全血分离血清,或EDTA抗凝血分离血浆,取100-500微升置-20℃或-70℃冰箱保存,干冰运输。

    备注
    本市内细胞样品也可以直接常温运送,运送时在培养瓶中装满培养液并以封口膜封口,然而某些实验条件中包含时间限制,仍建议冻存后运输。
    所使用的1.5ml冻存管或离心管、枪头等必须高温灭菌,装好样品后管口需要以封口膜封好。
    快递运输所用干冰量至少为8公斤,且运输用泡沫箱需用封箱带密封。

编辑: helen

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